滇产工业用大麻秆芯硫醇胺法制浆废液中富含多聚糖
， 因
此 有 必 要 对 该 制 浆 废 液 中 多 糖 的 回 收 、纯 化 、结 构 表 征 及 应 用
加 以 研 究
， 以更好的处理该制浆废液， 使 该 制 浆 方 法 符 合 发 展
循环经济的要求。
在 回 收 、纯 化 该 制 浆 废 液 多 糖 时
， 需 要 一 种 能 够 快 速 检 测
总糖含量的分析方法
， 以便能够监测回收、纯化过程， 为此有必
要建立合适的制浆废液总糖含量的分析方法。在生物学领域
，
苯 酚
－
硫 酸 法 由 于 具 有 方 法 简 单 、快 速 的 特 点
， 因 而 被 广 泛 用
于多 糖 的 定 量 检 测
［１￣３］
， 受此启发， 笔者将苯酚
－
硫 酸 法 加 以 改
良并用来检测该制浆废液总糖含量。
由 于 苯 酚
－
硫 酸 法 测 定 总 糖 含 量 时 缩 合 反 应 的 发 色 机 理
迄今尚不明了
， 因而进行定量测定的显色实验条件有它的经验
性
［４］
， 表现为测定不同来源多糖含量时， 显 色 条 件 存 在 差 异 ， 因
此 本 文 对 改 良 的 苯 酚
－
硫 酸 法 测 定 该 制 浆 废 液 总 糖 含 量 的 显
色 条 件 进 行 了 研 究
， 并对该方法 的 准 确 度 和 精 密 度 进 行 了 考
察
， 取得了满意的效果。
１
实验
１．１
实验原料和仪器
Ｄ－
木 糖
（ 生 化 试 剂） ；
９８％
浓 硫 酸
（
ＡＲ
） ； 苯 酚（
ＡＲ
） ； 制 浆
废 液
（ 硫 醇 胺 法 制 浆 ， 本 研 究 室 自 制） ；
Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－ ７５
凝 胶
（
Ｐｈａｒｍａｃｉａ
公司
） 。
ＴＵ－ １８００Ｓ
紫外
－
可见分光光度计
（ 北京普析通用仪器有
限责任公司
） ；
ＲＥ－ ５２ＡＡ
旋转蒸发器
（ 上海亚荣生化仪器厂） 等。
１．２
实验方法
１．２．１
制浆废液多糖的提取
一定量滇产工业用大麻秆芯硫醇胺法制浆废液经过滤、减
压浓缩、
４
倍体积工业酒精醇沉、离心分离得沉淀
， 沉淀配制成
２５０ ｍＬ
水溶液
， 然后用
３
倍体积三氯甲烷萃取
， 水相减压浓缩
至
５０ ｍＬ
后
， 用
５
倍体积的二氧六环沉析、离心得沉淀
， 沉淀水
溶液用
Ｓｅｖａｇｅ
试剂脱蛋白至
Ｓｅｖａｇｅ
试剂相澄清后
， 将糖液在
蒸馏水中用透析袋透析
（ 切割分子量为
３５００
，
４８ｈ
） 。透析液浓缩
后用
４
倍体积的工业酒精醇沉
， 沉淀用无水乙醇、丙酮洗涤至
醇、酮液无色。最后
， 将多糖于
４０℃
真空干燥箱中干燥至恒重。
１．２．２
单糖标准溶液和样品溶液的配制
１ ．２．２．１
木糖标准溶液的配制
称取干燥至恒重的木糖标准品
２０２．２ ｍｇ
， 置
１００ｍＬ
容量
瓶中用蒸馏水定容后移取
５ｍＬ
， 再于
１００ｍＬ
容量瓶中用蒸馏
水定容。
１ ．２．２．２
样品溶液的配制
精 确 称 量
２３．２ｍｇ
按
１．２．１
小 节 制 备 的 多 糖
， 将 其 在
１００ｍＬ
容量瓶中用蒸馏水定容后备用。
１．２．３
显色条件的考察
１ ．２．３．１
正交实验
精确称取样品溶液
０．２ｍＬ
加入到
１０ｍＬ
具塞试管中
， 另取
０．２ｍＬ
蒸 馏 水 代 替 样 品 液 做 空 白 对 照 实 验
， 按 表
１
投 料
， 如 果
最后总体积不足
１０ｍＬ
， 则用蒸馏水补至
１０ｍＬ
， 按表
１
结 合
Ｌ
１８
（３
７
）
正交表、以吸光度为评价指标安排实验
， 完成显色反应后
于
４８０ｎｍ
处测定吸光度。
１ ．２．３．２
重复性实验
精确称取样品溶液
０．２ｍＬ
与试管中
， 补蒸馏水至
２．０ｍＬ
，
以
２．０ｍＬ
蒸馏水做空白
， 按正交实验得出的最优显色条件安排
实验
， 做三次重复性实验。
１．２．４
制浆废液总糖含量的测定
１ ．２．４．１
标准曲线的绘制
精密吸取木糖标准液
０．１
、
０．２
、
０．３
、
０．４
、
０．５
、
０．６
、
０．７
、
０．８ｍＬ
，
分别置
１０ｍＬ
具塞刻度试管中并补蒸馏水至
２．０ｍＬ
， 以
２．０ｍＬ
蒸馏水 做 空 白
， 按前面优化的显色条件显色， 显色液在
４８０ｎｍ
处测吸光度。
１ ．２．４．２
换算因子测定
移取样品液
０．２
于试管中并补蒸馏水至
２．０
， 以
２．０
蒸馏水
做空白
， 显色后显色液在
４８０ ｎｍ
处测吸光度。
１ ．２．４．３
制浆废液总糖含量测定与稳定性实验
精确移取
０．２ ｍＬ
制浆废液
， 在
１００ ｍＬ
容量瓶中定容后移
取
１
于
１０ ｍＬ
具 塞 刻 度 试 管 中
， 补 蒸 馏 水 至
２．０ ｍＬ
， 另 取
２．０ｍＬ
蒸馏水做空白对照。按得到的显色条件显色
， 显色液在
４８０ｎｍ
处测吸光度。然后分别于显色后
０．５
、
１
、
２
、
３
、
２４
小时在
４８０ ｎｍ
处测吸光度。
制浆废液总糖含量的快速检测
徐恒启
１
， 陈克利
２
， 王永杰
１
（
１ ．
沈阳工业大学石油化工学院
， 辽宁 辽阳
１ １ １ ００３
；
２．
昆明理工大学化学工程学院
， 云南 昆明
６５０２２４
）
【 摘
要】
研究了用改良的苯酚
－
硫酸法测定工业用大麻秆芯硫醇胺法制浆废液总糖含量的显色反应条件
， 考察了该方法
测定制浆废液总糖含量时的准确度和精密度。研究表明
， 在
６％
苯酚水溶液用量为
２ｍＬ／ １００ｕｇ
总糖、浓硫酸用量
１５ ｍＬ ／ １００ｕｇ
总
糖、显色温度
２５℃
、显色时间
１５ｍｉｎ
时
， 改良的苯酚
－
硫酸法可以准确、快速测定该制浆废液总糖含量。
【 关 键 词】
大麻秆芯
； 制浆废液； 多糖； 分析
【 中 图 分 类 号】
Ｏ６３６．２
【 文 献 标 识 码】
Ａ
【 文 章 编 号】
１００３－ ２６７３（２００７）１１－ ００３０－ ０２
【 作 者 简 介】
徐恒启
（
１９７１－ ） ， 男， 硕士， 讲师， 研究方向： 糖化学、工业废水处理。
广西轻工业
ＧＵＡＮＧＸＩ ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＬＩＧＨＴ ＩＮＤＵＳＴＲＹ
化工与材料
２００７
年
１１
月
第
１１
期
（ 总第
１０８
期
）
３０