绿色环保的生物学功能评估
统计学处理
应用
SPSS11.0 统计分析软件进行处理。各组实验数据以百分数表示,各因子蛋白之间
的比较采用两样本
t 检验,P<0.01 表示差异具有统计学意义。
结果
1 胸水细胞 HE 染色形态学观察
胸水细胞经
HE 染色行形态学观察。经高性能、绿色环保组织细胞保存材料固定保存的
胸水细胞核浆固定充分,未见非特异性杂质;经常规
95%乙醇固定的胸水细胞胞浆较少,
甚至萎缩消失,细胞核有碎裂现象。结果见图
1。
2Westernblotting
经新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料固定保存的胸腹腔积液组织细胞
CK、CEA
和
P53 的蛋白表达结果见图 2。定量测试其灰度值水平分别是 91%、86%和 88%,由常规固
定液保存的细胞
CK、CEA 和 P53 的蛋白表达水平分别是 46%、38%和 31%,两种保存方法
相比具有显著性差异(
P<0.05)。
讨论
若胸腹腔积液标本不能立即送检,需加少许防腐剂,以防止细胞自溶。某些胸腹腔积液
内含有大量纤维蛋白、粘液蛋白、纤维素、组织凝血活酶等各种凝血因子,极易形成凝块,严
重影响检验结果的准确性。因此,对这些病例进行胸腹腔积液穿刺抽液时,应预先在标本器
皿内加
1/10 量的 3.8%枸橼酸钠或 0.1ml 肝素,以防止其发生凝固,但加入抗凝剂后对细胞
形态有一定影响。为了改善组织细胞保存液的性能,克服其缺点,我们创新性应用独特技术
工艺,开发研制了新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料。此材料将乙醇:冰醋酸:丙酮:
链激酶按
3
∶1∶1∶0.5 比例配制,胸腹腔积液经处理后,组织细胞成分按比重沉积于底层,纤
维蛋白、粘液蛋白、纤维素及红细胞等杂质经洗脱液洗脱掉。我们进一步应用荧光定量
PCR
和
Westernblotting 技术,从 mRNA 和蛋白水平检测此组织细胞保存材料的生物学性能。
研究结果显示,与常规保存液相比,新型高性能、绿色环保组织细胞保存材料较好的固
定保存了胸腹腔积液组织细胞的抗原性,其
CK、CEA 和 P53 的表达水平明显高于经常规保
存液处理组。目前广泛应用的薄层液基细胞技术在制作胸腹腔积液细胞涂片时,总体采样量
增加、读片面积缩小、背景清晰,利于降低漏诊率和误诊率,提高了与组织学诊断的符合率。
但是,由于方法原理限制,这类技术无法对送检标本的细胞进行全面处理,导致被检标本