的稀释液各

1ml，分别加入3个Baird-Parker琼脂平板，每个平板的接种量分别为0.3ml、0.3ml、

0.4ml。用灭菌L型涂布棒涂布整个平板，置于（37

±1

℃）恒温箱中培养24h。之后分别对3个

平板上生长的周围有浑浊带的黑色菌落进行计数。转接入血平板，（

37

±1

℃）恒温箱中培

养

24h。

3、涂片、染色与镜检

将纯培养的未知菌涂片，革兰氏染色，显微镜观察。

4、生化实验

①触酶试验

在载玻片上滴

1滴3%的过氧化氢，调取纯化的细菌放在过氧化氢中观察变化。 30s内产生大

量气泡者为阳性，不产生气泡者为阴性。

②血浆凝固酶试验

吸取

1：4新鲜兔血浆0.5ml，放入小试管中，再加入培养24h的2

①中的肉汤培养液0.5ml，摇

荡均匀，放入（

37

±1

℃）恒温箱中培养，每0.5h观察一次，观察6h，检查是否出现凝固。将

试管倾斜或倒置时，呈现凝块状，可判定为阳性，同时以已知阳性葡糖球菌和阴性肉汤作
为对照。

5、动物感染实验

用无菌生理盐水将

2

①中血琼脂板上纯化的菌落洗下后，以0.5ml/只腹腔注射入小白鼠体内，

同时用灭菌生理盐水注射入另外的小白鼠体内，以做对照，分别在相同条件饲养，观察其
症状。对感染试验出现症状或死亡的小白鼠进行剖检，并采集病料，进行分离。

二．结果与分析

1、培养特性及形态特征

①培养特性

在

37

℃条件下，需氧与厌氧培养的血液营养琼脂平板均长出光滑、湿润、隆起，约1mm大小

的金黄色菌落，并且有

β溶血现象。

②镜检结果

显微镜下观察该菌为革兰氏阳性球菌，排列成葡萄串状，也有个别

2个或3个球菌相连。根据

菌落形态、镜检结果怀疑该菌为葡萄球菌。

2、菌落计数报告

将直接计数法试验中的

3个平板中疑似黑色葡萄球菌的金黄色菌落数相加，乘以血浆凝固酶

试验阳性数，除以

5，在乘以稀释倍数，即为每克样品中金黄色葡萄球菌数量。

3、动物感染试验

只注生理盐水的小白鼠没有任何变化：接种分离菌的小白鼠在

9h内死亡。将死亡的小白鼠剖

检采集病料，进行细菌分离和生化试验，得到与原分离菌。