2

Click to add notes

HSA 临床使用量大，每针剂量通常达 10g 而大多数蛋白质药物使用的剂量仅

为 Pg 或 ng 级，因此 HSA 的纯度要求比其他蛋白质药物要求更为严格，因

此 HAS
的纯化技术非常关键。

目前 , 白蛋白的纯化方法主要可以分为 3 类 : 沉淀法 , 层析法 , 沉淀法和层析

结合法 ,
沉淀法较具代表性的是低温乙醇沉淀法 , 最早由 cohn

 

于 1946 年 发展起来，

此法
经过多次改进后 , 成为目前广泛使用的低温乙醇沉淀法 , 欧洲国家多采用这

种方
法生产白蛋白 , 我国的许多药厂如三九 , 莱士 , 上海生物制品研究所等也采用

的是
这种方法
. 这种方法主要的缺点是步骤烦琐 , 需要 40 个小时以上才能完成一个循环 ,

产品回

收率和纯度都较低 , 多聚体含量高 .

鉴于沉淀法生产白蛋白的缺点 ,Parmacia 公司推出一套纯层析纯化工艺 , 这个

工艺
采用了三步离子交换 , 产品回收率和纯度都有所提高 . 有一些厂家已经投入

生产 .
沉淀 - 层析工艺综合了沉淀法和层析法的优点 , 采用这种方法生产白蛋白较

成功的例子是澳大利亚 CSL

 

公司 , 产品的纯度可达 99.5%, 年产量约 300 吨 .

但是 , 这些工艺都有一个共同的缺点 , 步骤烦琐 , 回收率低 . 亲和层析具有高

效的优点 , 用亲和技术纯化白蛋白可以解决上述问题 , 但是传统设计的配基

吸附容量低 , 选择性低 , 限制了它的应用 . 随着计算机模拟技术的发展 , 仿生

亲和层析的概念被提出 ,.
2001

 

年，李荣秀等发展了一种新的仿生配基 AT23 来大规模纯化人血清白蛋

白，使用 AT23 纯化白蛋白需一步经过凝胶过滤脱盐，再经过一步亲和层 ,

白蛋白的纯度可达 99% （电泳纯）， 97% （ HPLC 纯），白蛋白回收率达

90% 左右。但是由于血浆盐浓度较高，在进行亲和层析之前，需要经过脱盐

步骤，否则白蛋白不能与 3 -  氨甲基吡啶亲和配体结合。增加了工作量，对

生产成本也是一种浪费。