它是实验室最常用的检测方法。酶是能够催化化学反应的特殊蛋白质，其催化效力超
过所有人造催化剂，ELISA 是将酶催化的放大作用与特异性抗原抗体反应结合起来的
一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体以后，既不影响抗原抗体反应的特异性，也不
改变酶本身的活性。因此 ELISA 具有准确性高、检测时间短、价格低廉、判断结果有
客观标准、结果便于记录和保存等优点，适合于大批标本的检测，广泛应用于食品安
全检测、医疗检测以及免疫实验分析等领域。

碱性磷酸酯酶，β－Ｄ－半乳糖苷酶，葡萄糖氧化酶，碳酸酐酶，乙酰胆碱酯酶，6－
磷酸葡萄糖脱氧酶等。常用于 ELISA 法的酶有辣根过氧化物酶，碱性磷酸酯酶等，其
中尤以辣根过氧化物酶为多。酶结合物是酶与抗体或抗原, 半抗原在交联剂作用下联结
的产物。是 ELISA 成败的关键试剂，它不仅具有抗体抗原特异的免疫反应，还具有酶
促反应，显示出生物放大作用，但不同的酶选用不同的底物。ELISA 必须遵守以下 3
个核心原理：1）抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙
烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；2）抗原或抗体可通过共价键
与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；3）酶结合物
与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存
在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的。

酶联免疫检测仪、酶标抗原/抗体、包被液（0.05mol/L pH9.6 碳酸缓冲液）、稀释液
（0.01mol/LpH7.4 PBS－－Tween－－20）、洗涤液（同稀释液）、封闭液（5%脱
脂奶粉、1%BSA、5%血清等）、底物（TMB 溶液）、终止液（2M H2SO4）。