《癌症》

Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ

，

２００７

，

２６

（

１１

） ：

１２１１－ １２１４

・基础研究・

华中科技大学同济医学院

附属协和医院妇产科，

湖北 武汉

４３００２２

Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ
Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ

，

Ｕｎｉｏｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ

，

Ｔｏｎｇｊｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ

，

Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ
ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ

，

Ｗｕｈａｎ

，

Ｈｕｂｅｉ

，

４３００２２

，

Ｐ． Ｒ． Ｃｈｉｎａ

通讯作者： 刘

义

Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ ｔｏ

：

ＬＩＵ Ｙｉ

Ｔｅｌ

：

８６－ ２７－ ８５３５１６１４

Ｅ－ｍａｉｌ

：

ｌｉｑｕｎ９４＠１６３．ｃｏｍ

收稿日期：

２００７－０４－１７

修回日期：

２００７－０５－２９

细胞外信号调节激酶 １ ／２ 在瘦素促进子宫内膜癌
Ｉｓ ｈｉｋａｗａ

细胞增殖中的作用

龚 成，

刘 义，

肖 维，

尹 婕，

王冬花，

盛 慧

Ｔｈｅ Ｒｏｌｅ ｏｆ ＥＲＫ１ ／２ ｉｎ Ｌｅｐｔｉｎ Ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ Ｉｓｈｉｋａｗａ

ＧＯＮＧ Ｃｈｅｎｇ

，

ＬＩＵ Ｙｉ

，

ＸＩＡＯ Ｗｅｉ

，

ＹＩＮ Ｊ ｉｅ

，

ＷＡＮＧ Ｄｏｎｇ －Ｈｕａ

，

ＳＨＥＮＧ Ｈｕｉ

［

ＡＢＳＴＲＡＣＴ

］

ＢＡＣＫＧＲＯＵＮＤ ＆ ＯＢＪ ＥＣＴＩＶＥ

：

Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｉｃ ｓ ｔｕｄｉｅｓ ｓ ｈｏｗｅｄ

ｔｈａｔ ｌｅｐｔｉｎ ｉｓ ｃｌｏｓ ｅｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓ ｉｓ ｏｆ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ ｃａｎｃｅｒ

，

ｂｕｔ ｔｈｅ

ｍｅｃｈａｎｉｓ ｍ ｉｓ ｕｎｃｌｅａｒ．

Ａｓ ａ ｍｉｔｏｇｅｎｉｃ ａｇｅｎｔ

，

ｌｅｐｔｉｎ ｃａｎ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ

ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｎｙ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｃｅｌｌｓ ．

Ｔｈｉｓ ｓ ｔｕｄｙ ｗａｓ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ

ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓ ｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓ ｅ １ ／２

（

ＥＲＫ１ ／２

）

ｉｎ ｌｅｐｔｉｎ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｔｈｅ

ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ Ｉｓ ｈｉｋａｗａ． ＭＥＴＨＯＤＳ

：

Ｔｈｅ

ｅｘｐｒｅｓ ｓ ｉｏｎ ｏｆ ｌｅｐｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＯＢ－Ｒｂ ｉｎ Ｉｓ ｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ
ｆｌｕｏｒｏｉｍｍｕｎｏａｓ ｓ ａｙ．

Ｉｓ ｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｂｙ ｌｅｐｔｉｎ ａｔ ｖａｒｉｏｕｓ

ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ

（

０

，

１０

，

５０

，

１００

，

ａｎｄ １５０ ｎｇ ／ｍｌ

）

ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅ

（

６

，

１２

，

ａｎｄ

２４ ｈ

）

． Ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｂｙ ＭＴＴ ａｓ ｓ ａｙ． Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ

，

ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ

ＰＤ９８０５９

，

ｓ ｅｌｅｃｔｉｖｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ＥＲＫ１ ／２

，

ｏｎ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｓ ｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ

ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｌｅｐｔｉｎ ｗａｓ ａｌｓ ｏ ｓ ｔｕｄｉｅｄ． Ｉｓ ｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ １００ ｎｇ ／ｍｌ
ｌｅｐｔｉｎ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅ

（

２０

，

４０

，

ａｎｄ ６０ ｍｉｎ

） ，

ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ

ｐｈｏｓ ｐｈｏｒｙｌａｔｅｄ ＥＲＫ１ ／２

（

ｐ－ＥＲＫ１ ／２

）

ａｎｄ ＥＲＫ１ ／２ ｗｅｒｅ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｂｙ Ｗｅｓ ｔｅｒｎ

ｂｌｏｔ．

ＲＥＳＵＬＴＳ

：

Ｆｌｕｏｒｏｉｍｍｕｎｏａｓ ｓ ａｙ ｓ ｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｐｒｅｓ ｅｎｃｅ ｏｆ ＯＢ－Ｒｂ ｉｎ

Ｉｓ ｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ． Ｌｅｐｔｉｎ ｓ ｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｓ ｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ． Ｔｈｉｓ ｅｆｆｅｃｔ
ｗａｓ ｍａｘｉｍａｌ ａｔ １００ ｎｇ ／ｍｌ ａｆｔｅｒ ２４－ｈｏｕｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ

，

ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ

ｓ ｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ １００ ｎｇ ／ｍｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ １５０ ｎｇ ／ｍｌ ｇｒｏｕｐ

（

Ｐ ＝

０．１２９

）

．

Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ＥＲＫ１ ／２ ｐｈｏｓ ｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｂｙ ＰＤ９８０５９ ｓ ｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｒｅｄｕｃｅｄ

ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｓ ｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ｓ ｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｂｙ ｌｅｐｔｉｎ． Ｗｈｅｎ ｔｒｅａｄｅｄ ｗｉｔｈ １００
ｎｇ ／ｍｌ Ｌｅｐｔｉｎ ａｎｄ １００ μｍｏｌ／Ｌ ＰＤ９８０５９ ｆｏｒ ２４ ｈ

，

ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ

（

６．８８±０．８６

）

％． ＥＲＫ１ ／２ ｐｈｏｓ ｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｗａｓ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｓ ｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎ Ｉｓ ｈｉｋａｗａ

ｃｅｌｌｓ ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ １００ ｎｇ ／ｍｌ ｌｅｐｔｉｎ． ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ

：

Ｌｅｐｔｉｎ ｍａｙ ｐｒｏｍｏｔｅ

ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ ｃａｎｃｅｒ Ｉｓ ｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ＥＲＫ１ ／２
ｓ ｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ．
ＫＥＹＷＯＲＤＳ

：

Ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ ｎｅｏｐｌａｓ ｍ

；

Ｌｅｐｔｉｎ

；

Ｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓ ｅ

；

Ｉｓ ｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌ

；

Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ

【摘

要 】 背 景 与 目 的 ： 流 行 病 学 研 究 提 示 瘦 素 与 子 宫 内 膜 癌 的 发 生 有 关 ， 但 其

作用机制尚 不清楚。瘦素作为促有丝分裂原， 能够显著促进多种细胞的生长增殖。
本 研 究 的 目 的 在 于 探 讨 细 胞 外 信 号 调 节 激 酶

１ ／２

（

ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ

ｋｉｎａｓｅ １ ／２

，

ＥＲＫ１ ／２

）

在瘦素促进子宫内膜癌细胞增殖中的 作用。方法： 免疫荧光染

色 检 测

Ｉｓｈｉｋａｗａ

细 胞 中 瘦 素 受 体 的 表 达 ； 于

Ｉｓｈｉｋａｗａ

细 胞 中 分 别 加 入 不 同 浓 度 的

瘦 素 （

０

、

１０

、

５０

、

１００

、

１５０ ｎｇ ／ｍｌ

） ，

作 用 不 同 时 间 （

６

、

１２

、

２４ ｈ

） ，

ＭＴＴ

法 检 测 各 组 细

胞 的 增 殖 情 况 ； 同 时 应 用

ＥＲＫ１ ／２

激 酶 特 异 性 抑 制 剂

ＰＤ９８０５９

阻 断

ＥＲＫ１ ／２

磷 酸

化 ， 观 察 其 对 瘦 素 促 进

Ｉｓｈｉｋａｗａ

细 胞 增 殖 的 影 响 ； 应 用 免 疫 印 迹 技 术 检 测

１００ ｎｇ ／

ｍｌ

瘦 素 作 用 于

Ｉｓｈｉｋａｗａ

细 胞 不 同 时 间 后 （

２０

、

４０

、

６０ ｍｉｎ

）

ＥＲＫ１ ／２

的 活 化 水 平 （ 以

ｐ－ＥＲＫ１ ／２

与

ＥＲＫ１ ／２

的 比 值 表 示 ） 。 结 果 ： 免 疫 荧 光 检 测 结 果 证 实

Ｉｓｈｉｋａｗａ

细 胞

存在瘦素受体的表达； 瘦素能明显 促进

Ｉｓｈｉｋａｗａ

细胞的增殖， 在

０～１００ ｎｇ ／ｍｌ

范围

内瘦素浓度越高， 细 胞 增 殖 越 显 著 ，

１００ ｎｇ ／ｍｌ

瘦 素 作 用

２４ ｈ

其 增 殖 效 应 最 大 （

Ａ

１２１１