苹果酒苹果酸乳酸发酵乳酸菌的筛选
*
潘海燕
1
徐 岩
1
赵光鳌
1
李记明
2
1( 江南大学生物工程学院教育部工业生物技术重点实验室, 无锡, 214036)
2( 张裕葡萄酒股份 有限公司, 烟台, 264000)
摘
要 首先根据乳酸菌对苹果酒风味的贡献 情况筛选出 3 株乳酸菌, 再从 微生物角度 对乳酸菌
的生理特征以及环境因素对乳酸菌生长的影响 进行了研究和比较
, 发现 Oenococcus oeni L4 能够在
SO
2
和乙醇体积分数分别为
50 mg/ L 和 6% , pH 3. 2 时良好的生 长; 该菌具有良好的苹果酸降解能
力
, 达到 2281 52 mg/ ( L# d) , 表明 O1 oeni L4 能够适应于我国起 泡苹果酒的 酿造, 是 1 株优 良的苹
果酒苹果酸乳酸发酵菌株。
关键词
苹果酒, 苹果酸乳酸, 发酵, 乳酸菌, 特性
第一作者: 硕士研究生( 徐岩为通讯作者) 。
* 国家/ 十五0 科技攻关项目( No1 2001BA501AOF)
收稿时间: 2004- 03- 15
苹果酸 乳酸发酵( malolactic fermentation,
简称
MLF) 是苹果酒酿造中非常重要的生化反
应过程
[1~ 3]
。
目前
, 由于我国用于苹果酒酿造的苹果品
种与国外专用苹果品种不同
, 因而筛选适合我
国苹果品种的
MLF 乳酸菌具有重要意义。针
对我国苹果酒苹果酸乳酸发酵研究 的实际情
况
, 文中选择明串珠菌为研究对象, 主要研究了
其对苹果酒风味贡献
, 在苹果酒中的生长情况
以及发酵阶段对于苹果酸的降解情况。
1 材料与方法
111 实验材料
11111 菌种及试剂
研究中所 用的
7 株乳 酸菌均 为 Oenococ2
cus, 分别来源于国内外果酒或果汁。实验用有
机酸标样均购于
F luka ( 德国) 公 司, 其他 试剂
均为分析纯。
11112 培养基
菌种保藏培养基主要是改良的
MRS 培养
基
[4]
。
菌种扩培培养基
[5]
: 稀释果汁+ 0105% 进
口酵母粉。
112 实验方法
11211 菌种的培养
菌种斜面 培养条件
: 培养温度 30 e , 厌氧
培养
4~ 5 d。
菌种扩培培养条件
: 培养温度 30 e , 培养 6
d 以达到稳定期。
11212 苹果酒( cider) 的前酵酒的制备
实验酿造原料为市售红富士苹果
, 苹果经
过洗净
, 切碎后榨汁。在榨汁过程中加入 100
mg/ L 的 SO
2
( 实际加入偏重亚硫酸氢钾, 1g 的
偏重亚硫酸氢钾相当于
015 g 的 SO
2
) 。为保
证苹果汁的固形物含量和总酸保持基本稳定
,
将果汁进行调糖调酸
, 固形物浓度在 13b~ 14b
( 手持糖度计测定) , 总酸调至 5 g/ L( 以苹果酸
计
) 。前酵是 在配有发 酵栓的 三角瓶 ( 容积 2
L) 中进行的。发酵菌 种为酿酒 酵母 ( Saccha 2
romyces cer evisae CCTCC M201022) , 采用 15 e
低温发酵
15 d 左右
[ 6]
。前酵结束后
, 采用倒吸
方法将上清酒液与下层酵母泥分离
, 并将苹果
酒通过
012 Lm 去除可能存在的残余酵母。经
测定
, 苹果酒的乙醇体积分数为 5% ~ 6% , 总
SO
2
浓度为
20 mg/ L。
11213 苹果酸乳酸发酵
前酵结束以后
, 将扩培好的乳酸菌按体积
比
10% 的接种量( 细胞密度达到 10
6
cfu/ mL )
11
食
品与发酵工业
F
ood and Fermentat ion Indus tries
2004 年第 30 卷第 10 期( 总第 202 期)