【摘要】本文对利用黑曲霉发酵法生产壳聚糖的中试实验进行了研究，确定了最佳工艺，
为实现工业化生产奠定了基础。

 

　　【关键词】壳聚糖

;黑曲霉;发酵工艺;提取 

　　

Study on Production of Chitosan by Fermentation of Aspergillus Niger in Medium Scale 

　　

WEIYan 

　　（

Lunan Hope Pharmaceutical Co., LtdShandongLinyi272600） 

　　【

Abstract】This article was researched on the middle-scale experiment to product chitosan by 

fermenting  use  aspergillus,  determined  the  best  technological  parameter,  which  provide  the 
foundation for the industrial production 
　　【

Key words】Chitosan;Aspergillus;Fermentation Process;Extraction 

　　

 

　　甲壳素（

Chitin）是自然界存在的唯一碱性同聚多糖，含量仅次于纤维素。甲壳素分链

的强烈的包裹作用和结晶区内强烈的氢键使其化学反应活性很低，溶解性也差，因而大大
限制了它的实际应用。壳聚糖（

Chitosan）是甲壳素经脱乙酰化处理的产物，具有生物相容

性、生物降解性、无毒性、几乎无过敏反应等特点，已在食品、化工、农业、医药、生化、环保等
领域广泛应用，被喻为继糖、蛋白质、脂类、维生素、矿物质之后的第六生命要素

[1] 。 

　　目前利用黑曲霉发酵制备壳聚糖的研究非常活跃，也取得了很多成果。何灏

 彦[2]等通

过正交实验确定了最佳发酵培养基。黄惠莉

[3]等采用机械破碎和酸碱交替结合，从菌体中

提取甲壳素。曹健

[4]等则采用电解法提取甲壳素。而在甲壳素转化为壳聚糖的研究中，多使

用碱量法。黄惠莉

[3]等采用高压稀碱法处理甲壳素，蔡中丽[5]等通过加入乙醇来降低碱浓

度，郦和生

[6]等则对利用微波技术提取壳聚糖进行了研究。 

　　总之，利用黑曲霉发酵生产壳聚糖的研究非常活跃，也取得了很多成果。但要使发酵法
实现工业化，还有很多问题需要解决。因此，在将实验室成果转化为工业技术前，必须先进
行中试生产研究。

 

　　作者在组织中试生产的过程中，重点进行了工艺选择、生产条件优化等方面的研究，并
形成了一套较为成熟的生产流程。

 

　　

1.实验 

　　

1.1 菌种、培养基、实验设备 

　　菌种：黑曲霉

(Aspergillus niger) 0 代，由中国药品生物制品检定所提供，传至第三代使

用。

 

　　根据文献资料，选择使用以下培养基。

 

　　斜面培养基：改良马丁琼脂培养基

 

　　扩大培养基

[7]：葡萄糖 2%、蛋白胨 2%、酵母浸出汁 1%,PH6.0 

　　发酵培养基：玉米浆

3%、葡萄糖 3%、硫酸镁 1%、磷酸二氢铵 0.01%、磷酸二氢钾

0.005% 
　　设备容量：

2000L 

　　生产环境：

100000 级洁净区 

　　

1.2 实验方法 

　　

1.2.1 壳聚糖产品的质量分析 

　　脱乙酰度：采用酸碱滴定法测定游离氨含量，按下式计算壳聚糖脱乙酰度。

 

　　

D.D

�(C1V1-C2V2) ×0.016／G(100-W) ×0.0994 

　　式中：

C1-HCl 标准溶液的浓度(mol/L)；C2-NaOH 标准溶液的浓度(mol/L)；V1 加入的

HCl 标准溶液的体积(mL)；V2  加入的 NaOH 标准溶液的体积(mL)；W 为试样含水量
(105

℃烘干至恒重)；G 为试样质量(g)；0.016 为与 1ml 1mol/L HCl 溶液相当的胺量(g)；