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  摘要

 采用单因素试验优化榆黄菇产漆酶发酵条件,筛选出最适宜产漆酶发酵条件为:

接种量

3%,温度 30 

℃,初始 pH 值 6.0~7.0,加入可溶性淀粉作为碳源,加入蛋白胨、酵

母膏为氮源。

 

  关键词

 榆黄菇;漆酶;发酵条件 

  中图分类号

 S646.1+9 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2013)09-0079-01 

  榆黄菇是一种分解纤维素、木质素能力较强的木腐性食用菌,可在榆树等阔叶树、玉米
芯、稻草培养基上生长发育。漆酶为一类多酚氧化酶

[1],是可降解纤维素、木质素的主要酶

类之一。其在稻草秸秆的生物处理、生物除污

[2]、高分子聚合[3]等方面的应用具有巨大的潜

力。本文对榆黄菇产漆酶发酵条件进行了系统研究,以期为秸秆生物质工业化开发利用提供
必要的理论依据。

 

  

1 材料与方法 

  

1.1 试验材料 

  供试菌株为榆黄菇菌株,由吉林农业科技学院微生物实验室提供。其他供试材料有马铃
薯、蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、乳糖、玉米秸秆粉碎物、氨基乙酸、蛋白胨、酵母膏、酒石酸铵、
豆饼粉。供试试剂有(

NH4)2SO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O 等。 

  

1.2 试验方法 

  将活化的榆黄菇菌种接种于

PDA 培养基上,30 

℃培养,待培养基上长满菌落备用。 

  

1.2.1 接种量对榆黄菇产漆酶的影响。各量取 45.0 mL 培养基放入 6 个 150 mL 的三角瓶

中,接种量按

1%~11%(按 2 个百分点递增),30 

℃,110 r/min 摇床振荡培养,7 d 后测

酶活

[4-5]。 

  

1.2.2 温度对榆黄菇产漆酶的影响。在 30 

℃条件下培养 7 d 后,分别在 20、25、30、35、40 

℃的温度条件下再培养 4 d 后测酶活,其方法同上。 
  

1.2.3 初始 pH 值对榆黄菇产漆酶的影响。用醋酸缓冲液把基础液体培养基的初始 pH 值

分别调为

3.0、4.0、5.0、6.0、7.0,接种方法和培养方法同上,测酶活。 

  

1.2.4 碳源对榆黄菇产漆酶的影响。在基础产酶培养基中分别添加浓度为 20 g/L 的蔗糖、

葡萄糖、可溶性淀粉、乳糖和玉米秸秆粉碎物作为碳源。培养条件和酶活测定方法同上。

 

  

1.2.5 氮源对榆黄菇产漆酶的影响。在基础产酶培养基中分别加入浓度为 1 g/L 的硫酸铵、

蛋白胨、酵母膏、酒石酸铵、豆饼粉作为氮源,培养条件和酶活测定方法同上。

 

  

1.3 漆酶活力测定 

  按照

Rodort Bourbounais[6]方法,以 ABTS 为底物,酶的活力

△OD 值定义为:1 min 内

反应的酶液在

420 nm 波长下吸光值的增加量。 

  

2 结果与分析 

  

2.1 接种量对榆黄菇产漆酶的影响 

  从图

1 可以看出,最好的接种量是 3%。接种量太多,培养液粘度会增加,容易造成溶

氧不足,菌丝营养不足,且产生大量的生物热,使产酶活力下降。

 

  

2.2 温度对榆黄菇产漆酶的影响 

  过高或过低的温度均会降低菌株代谢速率,温度较低时,菌体生长较慢,酶活力偏低
温度较高时,菌体过早老化,酶活也偏低。从图

2 可以看出,最适温度为 30 

℃。 

  

2.3 初始 pH 值对榆黄菇产漆酶的影响 

  从图

3 可以看出,pH 值对榆黄菇产酶活力的影响较大,pH 值在 6.0~7.0 时酶活力最

大,过酸或过碱都会引起酶活的变化。

 

  

2.4 碳源对榆黄菇产漆酶的影响 

  从图

4 可以看出,榆黄菇产漆酶最适碳源为可溶性淀粉,其次是葡萄糖和玉米秸秆粉

碎物。