摘 要:目的:研究超声-表面活性剂法在黄柏生物碱提取工艺中的应用。方法:采用单
因素实验和正交实验考察不同因素对超声
-表面活性剂法提取生物碱的影响,优化最佳工艺
参数。结果:最佳提取工艺为提取温度
60
℃,乙醇浓度 80%,活性剂 TW60,料液比为
30
∶1,超声 30 min,提取率达到 7.24%,高于文献值 6.37%。结论:超声-表面活性剂对黄柏
生物碱的提取,具有提取率高、快速、有效等优点。
关键词:超声提取;表面活性剂;黄柏;生物碱
中图分类号:
R284.2 文献标识码:A
文章编号:
1007-2349(2011)08-0059-03
黄柏为芸香科植物黄皮树(
Phellodendron chinese Schneid)的干燥树皮,性苦、寒,具
有清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮的功效[
1]。现代药理学表明黄柏具有较强的广谱抗菌性,
对葡萄球菌有较强的抑制作用[
2],同时具有抗溃疡、降压、抗心律失常等作用。黄柏生物
碱为其主要有效成分[
3],具有抗心律失常,抗心力衰竭,抗肿瘤等活性[4]。
超声提取(
Ultrasonic extraction)技术主要是利用超声波的空化作用加速植物有效成分
的浸出提取,同时可以使药物组织内部的温度瞬时升高,加速有效成分的溶解[
5]。表面
活性剂[
6]是一种具有两亲结构、能够在界面上富集并显著改变界面性质的特殊化学物质,
具有润湿、渗透、增溶等功能特性。本文对几种表面活性剂进行考察,与超声技术进行结合,
以盐酸小檗碱为指标,优选出超声
―表面活性剂法提取黄柏生物碱的最佳工艺。
1 材料与方法
1.1 药材、仪器及试剂 药材:干燥川黄柏树皮(购自浙江磐安中药材市场)粉碎过 40
目筛,干燥保存。试剂:盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所);去离子水;乙醇
(分析纯);
SDS、CATB、TW60 均购自上海化学试剂公司。仪器:可见-紫外分光光度计,
超声波提取仪,
waters2695 液相色谱仪。
1.2 方法和结果
1.2.1 标准品液和供试液的制备 精密称取真空干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品 5.0 mg,
加去离子水定容于
100 mL 容量瓶中,摇匀,即得浓度为 0.05 mg/mL 的盐酸小檗碱标准品
储备液,备用。分别配质量分数
0.5%的表面活性剂,装入具塞的三角烧瓶中,之后加入川
黄柏
1.0 g,摇匀,超声提取,合并滤液,定容至 40 mL,分别取 0.1 mL,稀释至 50 mL,
摇匀,即得供试液。
1.2.2 标准曲线的建立 精密移取盐酸小檗碱储备液 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL
于
50 mL 容量瓶中,稀释至刻度,用去离子水做空白,在 345 nm 波长下分别测得吸光度 3
次,取均值。标准曲线见图
1。用最小二乘法经线性回归,得盐酸小檗碱浓度 C 与吸光度 A
的回归方程:
A=64.865C-0.0053,r=0.9994。结果表明,盐酸小檗碱在 1.0~5.0 μg/mL 浓度范
围内线性关系良好。见图
1。
2 实验内容
2.1 单因素实验 为考察超声波提取法各因素对黄柏总生物碱提取率的影响,对提取的
溶剂浓度、温度、料液比、提取时间四个因素进行单因素试验。按
2.1.2 中样品盐酸小檗碱含量
的测定步骤测吸光度,求出盐酸小檗碱提取率。
2.1.1 乙 醇 浓 度 对 盐 酸 小 檗 碱 提 取 率 的 影 响 精 密 称 取 黄 柏 药 材 1 g , 分 别 加 入
10%,30%,50%,70%,90%浓度的乙醇,于温度 60
℃,超声提取 30 min,由图 2 可知,
30%以上浓度的乙醇对黄柏总生物碱的提取率影响总体并不显著,在 70%乙醇浓度时提取
率最大,之后提取率反而随浓度的升高有所降低,故本试验选取
60%~80%这一范围作为考
察范围。见图
2。
2.1.2 温度对提取率的影响 精密称取黄柏药材 1 g,加入 70%浓度的乙醇,于 20
℃、30