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重庆师范大学学报( 自然科学版)
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第 ") 卷 第 $ 期
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香精香料废水降解微生物的筛选及鉴定
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王! 亮
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,蔡家利
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,段云霞
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,吕晶华
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($( 重庆理工大学 药学与生物工程学院,重庆 I###C#;"( 天津市环境保护科学研究院 分子生物学实验室,天津 J##$)$)
摘要:山东省某家香精香料厂废水中主要有机污染物是芳香族化合物,以叔丁基苯酚最难降解。为了筛选香精香料
废水降解微生物,实验采集上述香精香料厂好氧曝气池的活性污泥为样本,以叔丁基苯酚为唯一碳源,进行筛选并
分离出一株能降解废水的微生物。对该微生物的形态、生理生化特征进行鉴定,并对它的 $E< ,?4K 基因序列进行
分析比对。结果表明,该菌株属于类球红细菌属( !"#$#%&’()* +,- ),适应偏盐性和适当芳香有机物的废水环境中生
长并能有力地降解废水中的叔丁基苯酚。研究认为该菌株在有关废水处理方面的贡献难以估量。
关键词:香精香料;
$E< ,?4K;
生物降解;筛选;类球红细菌属
中图分类号:LH#J( $;MG$C
文献标志码:K! ! !
文章编号:
$EH"D EE)J("#$")#$D ##)$D #I
! ! 随着中国社会生活水平的提高,香精香料被大
量用在食品、化妆品以及除味剂中,使人们得到嗅觉
的享受。它们在人们的生活中越来越密不可分,因
而有关制造厂商也越来越多,同时也造成了生产污
水排放和治理的问题
[$DE]
。
香精香料的废水主要由重金属离子和有机大分
子污染物构成,其中以有机物污染最为严重。这些
有机物具有毒性大、浓度高、种类多、分子结构复杂
多样等特点,治理难度非常高
[H]
。然而,在含有上述
有机物的废水中仍然生存着微生物,它们必定存在
着自身适应这种环境的生理生化和形态学特征
[G]
。
由于这些微生物能以废水中有机物为原料合成自身
营养所需,因此从中筛选出的微生物,应具有降低废
水中有机物的作用
[)]
。
近年来,由于分子生物学技术的不断发展,人们
利用微生物解决污染问题的意识日益增强
[$#]
。微
生物降解有害物质不仅具有经济效益、环境效益,同
时还可为以后解决类似的环境污染问题提供参考和
借鉴
[$$D$I]
。为此,本研究以香精香料生产厂区的废
水为样品,采用生物学方法从中分离筛选微生物,并
对它们进行鉴定。
$ 材料和方法
$( $ 样品来源
研究用活性污泥于 "#$# 年 H 月份取自山东省
某香精香料厂好氧曝气池中。
$( " 培养基
N( O( 基础培养基成分为 P1<@
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$ 1,
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$ 51。SN 培养基成分为:蛋白胨 $# 1,酵
母粉 C 1,4&/- $# 1,琼脂粉 $( CT U "( #T 。
按以上配方称取培养基中成分配制两种培养
基,均分别用蒸馏水溶解定容到 $ S,并调 VO 值至
H( # U H( ",
分装到锥形瓶中,进行灭菌。其中 SN 固
体培养基在灭菌之前加入 $( CT U "( #T 琼脂即可。
N( O( 培养基可能会出现沉淀,可以用灭菌后的蔡氏
滤器过滤后再用。
$( J 筛菌
取好氧曝气池污泥接种在 N( O( 培养基中,里
面加有唯一碳源叔丁基苯酚,含量为 $## 51・S
W $
,
于 JH X 、"## 转摇床培养过夜,反复驯化 J 次以上,
即为活性污泥样品。
将上述活性污泥样品 "# 5S 于灭菌的锥形瓶
中,加入玻璃珠后剧烈振摇摇匀。取 #( J 5S 样本于
I 5S 离心管中,
再加入 "( H 5S 的灭菌蒸馏水,将该
溶液稀释 $# 倍,然后继续稀释,依次得到稀释度为
$#
W "
、
$#
W J
、$#
W I
、$#
W C
、$#
W E
和 $#
W H
的溶液,将当中
稀释度为 $#
W I
、
$#
W C
和 $#
W E
的溶液涂布在 SN 平板
上,于 JH X 下倒置恒温培养过夜。
在以上几个稀释度的平板中挑取各自菌落形态不
同的菌株进行画线培养,在 JH X 下倒置恒温培养过
夜。反复多次划线培养,
以确保能挑起单菌落为止。
!
收稿日期:
"#$$D #ID #G! ! 修回日期:
"#$$D #)D #I! ! 网络出版时间:
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资助项目:国家水体污染控制与治理科技重大专项( 4*( "##GYL#HJ$ID##$)
作者简介:王亮,男,硕士研究生,研究方向为疫苗与诊断技术;通讯作者:蔡家利,ZD5&3-:=[-\ =2+:( 8]+( =’
网络出版地址:0::V:F F ^^^( =’_3( ’8: F _=59 F ]8:&3- F C#( $$EC( 4( "#$"#$$C( $G#)( "#$"#$( )"‘#$H( 0:5-