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重庆师范大学学报（ 自然科学版）

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第 ") 卷 第 $ 期

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香精香料废水降解微生物的筛选及鉴定

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王! 亮

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，蔡家利

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，段云霞

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，吕晶华

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（$( 重庆理工大学 药学与生物工程学院，重庆 I###C#；"( 天津市环境保护科学研究院 分子生物学实验室，天津 J##$)$）

摘要：山东省某家香精香料厂废水中主要有机污染物是芳香族化合物，以叔丁基苯酚最难降解。为了筛选香精香料

废水降解微生物，实验采集上述香精香料厂好氧曝气池的活性污泥为样本，以叔丁基苯酚为唯一碳源，进行筛选并

分离出一株能降解废水的微生物。对该微生物的形态、生理生化特征进行鉴定，并对它的 $E< ,?4K 基因序列进行
分析比对。结果表明，该菌株属于类球红细菌属（ !"#$#%&’()* +,- ），适应偏盐性和适当芳香有机物的废水环境中生
长并能有力地降解废水中的叔丁基苯酚。研究认为该菌株在有关废水处理方面的贡献难以估量。

关键词：香精香料；

$E< ,?4K；

生物降解；筛选；类球红细菌属

中图分类号：LH#J( $；MG$C

文献标志码：K! ! !

文章编号：

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! ! 随着中国社会生活水平的提高，香精香料被大
量用在食品、化妆品以及除味剂中，使人们得到嗅觉
的享受。它们在人们的生活中越来越密不可分，因
而有关制造厂商也越来越多，同时也造成了生产污
水排放和治理的问题

［$DE］

。

香精香料的废水主要由重金属离子和有机大分

子污染物构成，其中以有机物污染最为严重。这些
有机物具有毒性大、浓度高、种类多、分子结构复杂
多样等特点，治理难度非常高

［H］

。然而，在含有上述

有机物的废水中仍然生存着微生物，它们必定存在
着自身适应这种环境的生理生化和形态学特征

［G］

。

由于这些微生物能以废水中有机物为原料合成自身
营养所需，因此从中筛选出的微生物，应具有降低废
水中有机物的作用

［)］

。

近年来，由于分子生物学技术的不断发展，人们

利用微生物解决污染问题的意识日益增强

［$#］

。微

生物降解有害物质不仅具有经济效益、环境效益，同
时还可为以后解决类似的环境污染问题提供参考和
借鉴

［$$D$I］

。为此，本研究以香精香料生产厂区的废

水为样品，采用生物学方法从中分离筛选微生物，并
对它们进行鉴定。

$ 材料和方法

$( $ 样品来源

研究用活性污泥于 "#$# 年 H 月份取自山东省

某香精香料厂好氧曝气池中。

$( " 培养基

N( O( 基础培养基成分为 P1<@

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@ #( " 1，

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#( #" 1，BO

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$ 1，

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$ 51。SN 培养基成分为：蛋白胨 $# 1，酵

母粉 C 1，4&/- $# 1，琼脂粉 $( CT U "( #T 。

按以上配方称取培养基中成分配制两种培养

基，均分别用蒸馏水溶解定容到 $ S，并调 VO 值至

H( # U H( "，

分装到锥形瓶中，进行灭菌。其中 SN 固

体培养基在灭菌之前加入 $( CT U "( #T 琼脂即可。

N( O( 培养基可能会出现沉淀，可以用灭菌后的蔡氏
滤器过滤后再用。

$( J 筛菌

取好氧曝气池污泥接种在 N( O( 培养基中，里

面加有唯一碳源叔丁基苯酚，含量为 $## 51・S

W $

，

于 JH X 、"## 转摇床培养过夜，反复驯化 J 次以上，
即为活性污泥样品。

将上述活性污泥样品 "# 5S 于灭菌的锥形瓶

中，加入玻璃珠后剧烈振摇摇匀。取 #( J 5S 样本于

I 5S 离心管中，

再加入 "( H 5S 的灭菌蒸馏水，将该

溶液稀释 $# 倍，然后继续稀释，依次得到稀释度为

$#

W "

、

$#

W J

、$#

W I

、$#

W C

、$#

W E

和 $#

W H

的溶液，将当中

稀释度为 $#

W I

、

$#

W C

和 $#

W E

的溶液涂布在 SN 平板

上，于 JH X 下倒置恒温培养过夜。

在以上几个稀释度的平板中挑取各自菌落形态不

同的菌株进行画线培养，在 JH X 下倒置恒温培养过
夜。反复多次划线培养，

以确保能挑起单菌落为止。

!

收稿日期：

"#$$D #ID #G! ! 修回日期：

"#$$D #)D #I! ! 网络出版时间：

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资助项目：国家水体污染控制与治理科技重大专项（ 4*( "##GYL#HJ$ID##$）

作者简介：王亮，男，硕士研究生，研究方向为疫苗与诊断技术；通讯作者：蔡家利，ZD5&3-：=[-\ =2+:( 8]+( =’

网络出版地址：0::V：F F ^^^( =’_3( ’8: F _=59 F ]8:&3- F C#( $$EC( 4( "#$"#$$C( $G#)( "#$"#$( )"‘#$H( 0:5-