营养代谢病检测技术
第七章
本章目的:
本章要求了解营养代谢病检测技术的基本知识。
本章重点:
1、血糖、蛋白质和脂肪代谢及微量元素测定。
2、消化吸收代谢过程
本章难点:
维生素测定。
第一节 蛋白质检测
第二节 血糖检测
第三节 脂肪代谢的检测
第四节 微量元素检测
第五节 维生素营养的检测
主要内容
一、血清总蛋白测定
二、血清白蛋白测定
三、血清蛋白电泳
四、血红蛋白测定
五、肌红蛋白测定
第一节 蛋白质检测(
Ketosis in dairy cows)
一、血清总蛋白测定
原理:
碱性溶液中蛋白质分子的肽键与铜离子作用,形成紫红色的复合物。这与两个尿素分子缩合
生成缩二脲,在碱性条件下与铜离子作用形成紫红色反应相似,故称为双缩脲反应。
一、血清总蛋白测定
试剂:
6mol/L 氢氧化钠溶液:溶解 120g 氢氧化钠于去离子水中,稀释至 500ml,置聚乙烯瓶内盖
紧保存。
双缩脲试剂:称
3 g CuSO4
•5H2O 和 9g 酒石酸钾钠(KNaC4H4O4•4H2O),先分别溶于
蒸馏水,加入碘化钾
5g,待完全溶解后混合,加入 6mol/L 氢氧化钠 100ml,最后以蒸馏水
加至
1L 置聚乙烯瓶内盖紧贮存。
蛋白标准液:收集混合血清,用凯氏定氮法测定蛋白质含量,亦可用定值参考血清或标准
蛋白作标准。
一、血清总蛋白测定
操作:
取三支试管按下表加入式样,混匀
37 摄氏度水浴放置十分钟,以空白管调零,540nm 波长
测定吸光度。
项目 测定管 标准管 空白管
血清/ml 1.00 - -
蛋白质标准液
/ml - 1.00 -
理生盐水/ml - - 1.00
双缩脲试剂
/ ml 5.00 5.00 5.00
二、血清白蛋白测定