总胆红素重氮法检测操作规程

产品注册号：国食药监械（准）字

2004 第 3400400 号

产品执行标准：

YZB/国 2221-2003

原理：
总胆红素在二甲亚砜等加速剂作用下，在酸性溶液中与重氮苯磺酸作用生成紫色的偶氮胆
红素，与经过同样处理的校准液比较，即可计算出样品中总胆红素的含量。
样品准备：
样品为新鲜空腹无溶血的血清或血浆。样品应在低温条件下运输保存，样品中总胆红素

2-

8℃密闭避光保存可稳定 3 天，冰冻保存可稳定 3 个月。
测定步骤：
1.基本参数：
方法：终点法
波长：

560nm                反应温度：3

7℃

光径：

10mm                  反应时间：5min

2.操作：
根据测定所需试剂量，取

R1 和 R2 按 50：1 比例混合，即为工作液。根据以上参数按下表

操作：

测定
（

U）

测定对照
(UB)

校准
（

C）

校准对照
（

CB）

样品（

ul）

校准液（

ul）

工作液（

ul）

R1    （ul）

100
__
1500
__

100
__
__
1500

—
100
1500
__

—
100
__
1500

混匀，

3

7℃恒温 5 分钟，560nm 波长，以工作液调零，测定各管吸光度值。

计算：
1.  因素法：用本试剂盒操作，测得偶氮胆红素参考摩尔吸光系数为 74290 （波长
=560nm，光径=10mm，样品/试剂=1/15），其相应的 F 值为 215.经严格检定标化的
仪器，可按以下公式计算结果：
样品

Tbil 含量（umol/L）=(Au-AuB

)×215

例：

Au=0.080   AuB=0.040 则

样品

Tbil 含量（umol/L）=（0.080-0.040）×215=8.6

2. 比例终点法：
样品

Tbil 含量（umol/L）=Au-AuB/Ac-AcB×Cc

例：

Au=0.040  Ac=1.095  AcB=0.030   Cc=230umol/L 则

样品

Tbil 含量（umol/L）=【（0.090-0.040）÷（1.095-0.030）】×230=10.8

校准及质控：
1. 建议使用本公司的胆红素校准血清进行校准。
2. 推荐使用本公司的生化质控血清进行室内质控。
性能指标：
1. 线性范围：0.4～342.0umol/L,r≥0.99