暗视野显微镜检查法
暗视野显微镜又叫暗场显微镜,是一种通过观察样品受侧向光照射时所产生的散射光
来分辨样品细节的特殊显微镜。
1、暗视野显微镜的原理和结构特点
暗视野显微镜和一般的明视野显微镜区别在于二者的聚光器不同,暗视野显微镜装有
一个中央遮暗的聚光器,使光线不能通过聚光器,而只能从聚光器四周边及未遮暗的部位
斜射到载玻片的标本上。因光线是斜射的,不能进入物镜,故观察的视野是暗的,而聚光器
斜射到菌体上的光线,因光散射作用而使菌体发出亮光,反射到物镜内,这样在显微镜中
可见到暗视野中明亮的物像。
暗视野显微镜主要用于检查未染色标本的形态和运动能力。
2、操作方法
①使用研究用暗视野显微镜,或将普通光学显微镜上的聚光器取下,换上暗场聚光器。
②不论是使用干燥物镜还是油浸物镜,镜检时都应在聚光器的上透镜上加一大滴香柏
油。
③将制作好的细菌悬滴标本片置于载物台上,上升聚光器至顶部使油与载玻片接触。
④放大光源
。
⑤进行聚光器光轴调节及调焦。用
10*物镜找到被检物像,关小聚光器虹彩光圈至可在
视野中看到视场光阑的轮廓,再上下缓慢调整聚光器,这样会使视场光阑的像变得清晰,
如视场光阑不在场中央,利用聚光器外侧
的两个调节钮进行调整,当亮光点调到场中央后,
再将其开大,即可进行观察。