吸附破伤风疫苗

Xifu Poshangfeng Yimiao

Tetanus Vaccine，Adsorbed

本品系用破伤风梭状芽孢杆菌，在适宜的培养基中培养产生的毒素经甲醛脱毒、精制，

加入氢氧化铝佐剂制成。用于预防破伤风。

1 基本要求

“

”

生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合 凡例 的有关要求。
2 制造
2.1 菌种

“

”

生产用菌种应符合 生物制品生产检定用菌毒种管理规程 的有关规定。
2.1.1 名称及来源

采用破伤风梭状芽孢杆菌

CMCC64008 株或其它经批准的破伤风梭状芽孢杆菌菌种

。

2.1.2 种子批的建立

“

”

应符合 生物制品生产检定用菌毒种管理规程 的有关规定。
2.1.3 种子批的传代
主种子批自启开后传代应不超过

5 代，工作种子批启开后至疫苗生产，传代应不超

过

10 代。

2.1.4 种子批菌种的检定
2.1.4.1 培养特性
本菌为专性厌氧菌，适宜生长温度为

37℃。在庖肉液体培养基中培养，培养液呈浑

浊、产生气体、具腐败性恶臭。在血琼脂平皿培养基培养，菌落呈弥漫生长。在半固体培养基
穿刺培养，表现鞭毛动力。

2.1.4.2 染色镜检

 

初期培养物涂片革兰染色镜检呈阳性，杆形菌体，少见芽孢。

48 小时以后培养物涂

片革兰染色镜检，易转为阴性，可见芽孢，菌体呈鼓槌状，芽孢位于顶端为正圆形。

2.1.4.3 生化反应

ⅩⅣ 

不发酵糖类，液化明胶，产生硫化氢；不还原硝酸盐（附录

）。

2.1.4.4 产毒试验
取培养物的滤液或离心上清液

0.1ml 注射于体重 18～22g 小鼠的尾根部皮下，至少

4 只。于注射后 12～24 小时观察小鼠，应出现尾部僵直竖起、后腿强直痉挛或全身肌肉痉
挛等症状，甚至死亡。

2.1.4.5 特异性中和试验
取适量产毒培养物的滤液或离心上清液与相应稀释的破伤风抗毒素经体外中和后，

注射于体重为

18～22g 小鼠的腹部皮下，每只小鼠注射 0.4ml，至少 4 只；同时取未结

合破伤风抗毒素的培养物的滤液或离心上清液

0.4ml，注射小鼠的腹部皮下，作为阳性对

照。注射后

观察

5 天

，对照组小鼠

24 小时内

应出现明显破伤风症状并死亡，实验组小鼠在

观察时间内应存活。

2.1.5 种子批保存

种子批应冻干保存于

8℃以下；工作种子批也可 2～8℃保存于液体培养基中，效期

为

1 年。