食品微生物检验之纸片法

    摘要：纸片法在食品检测的实际应用中表现出操作简便、灵敏度高、速度快等特点，为食
品检测技术的发展提供了有力的技术支持。本文主要介绍了纸片法的原理和纸片法在食品中
微生物检测中的方法应用以及与平板计数法进行了对比研究。

 

　　关键词：食品检验

 纸片法 平板计数法 微生物检测 

　　前言：

 

　　食品安全问题越来越受到人们的重视，微生物对食品的污染问题也相应地备受关注。在
食品生产、加工、储存、运输、销售等各个环节中都有污染微生物的可能。一旦污染，微生物将
大量繁殖而引起食品腐败变质，或导致食源性感染和食物中毒，食品的检测与分析工作已
经提高到一个极其重要的地位。特别是为了保证食品的标准品质，开展食品科学技术研究，
寻找食品污染的根源，人们更需要对食品进行各种有效营养物质和对人体有害、有毒物质的
检验和分析。自

20 世纪 70 年代起，各种食品检测不断出现，主要包生物化学技术、纸片法

等，目前这些技术在食品检测和分析等方面已经得到了较好的应用，特别是纸片法。纸片法
以其操作简便、灵敏度高、速度快等优势在食品检测领域得到愈来愈广泛的应用

[1，2]。 

　　一、纸片法的原理

 

　　纸片法，即以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在
上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定微生物的方法

[3]。快速测试片法有以滤纸为载

体的测试片，这种测试片是一种水合物干膜，由上下两层薄膜组成，上层是聚丙烯薄膜，
下层是上印有网格的聚乙烯薄膜，通过一种冷水可溶性的凝胶剂附着在培养基上。培养基上
有微生物生长所需的营养物质、特异性显色物质和抗生素。

 

　　纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片
中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的
周围形成一种浓度梯度。在药物扩散的同时，纸片周围抑菌浓度范围内的测试菌不能生长，
而抑菌浓度范围外的菌株则继续生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。不同抗菌药物
抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而可能不同，抑菌圈的大小可反映测试
菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度（

MIC）呈负相关，即抑菌

圈越大，

MIC 越小。 

　　二、纸片法的优、缺点及改进

 

　　本文介绍的是北京陆桥公司研制的

Easy TestTM 纸片（简称 ET），E T 微生物测试纸

片是一种将脱水培养基附着于无纺布棉垫上的即用型检测产品，利用了特异性酶与特异性
显色底物反应的原理，使目标菌与非目标菌呈现可明显区别的不同特异性颜色，

ET 测试纸

片的培养载体采用了无纺布和水溶性营养底物的设计，具有良好的吸水性，可快速吸收测
试液，使微生物自动均匀分布于无纺布上，为测试液和营养底物创造了一个固定的混合区
域。这种纸片法排除了滤纸测试片不易计数、营养物质分布不均、显色指示剂单一和保水性差
的缺点，待测样品不需灭菌、本身带有培养基，样品可直接加入。其特点可归纳为：可应用
于现行

GB/T 4789-2008 和 SN 标准中；使用方便，即用型产品，省去配制步骤，减少工作

量；大量缩短检测时间，提高检测效率；降低对操作人员的技术要求；准确：灵敏度高、特
异性强；可用于食品微生物检测和环境卫生检测，可分别检测菌落总数、大肠菌群计数、霉
菌和酵母计数、金黄色葡萄球菌计数。如用大肠菌群快检纸片检测餐具的表面，操作简便、快