纯(阿拉丁试剂，中国).氧化铝、弗罗里硅土、硅胶和无水硫酸钠使用前在马弗炉中 650 ℃

烘 6 h，置于干燥器中备用;铜粉参照 EPA 3660A 方法进行活化;聚二甲基硅氧烷

(Polydimethylsiloxane，PDMS)购自 Specialty Silicone Products 公司(USA)，使用前切

成直径为 16 mm 的薄片(厚度 0.005 英寸，密度 0.972 g ·cm-3)，用 15mL 丙酮/正己烷(V/V，

1 ∶ 1)溶液超声清洗 20 min，保存于甲醇/水(V/V，1 ∶ 1)溶液中备用.多环芳烃菲、蒽、

荧蒽、芘、苯并[a]蒽、苯并[k]荧蒽和苯并[a]芘等标准品(阿拉丁试剂，中国)购自上海晶

纯生化科技有限公司.

2.2 底泥采集、分析及加标老化

本实验中所用的底泥采自上海洋山港潮间带表层底泥，其有机碳和黑碳的含量分别为

0.45%±0.03%和 0.11%±0.01%(李娟英等，2015).本研究选取 7 种具有不同梯度辛醇-水分

配系数(Kow)且检出频率较高的 PAHs 作为监测对象，并在海洋环境底泥风险评价分级的基础

上配置 3 个浓度梯度，分别为潜在生态风险效应低值(Effects Range Low，ERL，Long et al.,

1995)的 1、2 和 3 倍.以丙酮为载体，将 7 种 PAHs 混合液加入底泥中，混匀，4 ℃避光保存，

老化 28 d.

2.3 生物累积实验

菲律宾蛤仔购自上海市芦潮港菜市场，在盐度 25±2 和水温(20±1)℃且连续曝气的条

件下驯养 3 周以上.驯养过程中光周期为 16h:8h(光照:黑暗)，每天定时投加定量三角褐指

藻进行喂养.菲律宾蛤仔的脂肪含量为 0.51%±0.15%(测定方法参考 GB/T5009.6—2003).

参照 EPA 方法(EPA 600/R-99/064)，称取老化后的底泥约 2 kg(湿重)放入 5 L 玻璃缸

中，表面覆盖 4 L 左右的人工海水(用海水素和蒸馏水配制).静置 1d 后，于每个玻璃缸中放

入驯养后活力强、个体大小相近的蛤仔 25 只(壳长(32±2)mm、壳高(12±2)mm).采用半静水

式方法(日换水 1/2)(周永欣等，1989)进行累积实验，暴露条件同驯养过程且期间不喂食.

实验设置 1 个空白，每个浓度梯度设置两个平行，持续 28 d.实验结束后，将菲律宾蛤仔和

底泥取出，冷冻干燥后磨碎备用.

2.4 固相微萃取测定底泥孔隙水中 Cfree

根据 Li 等(2013)的计算方法，称取 400 g(湿重)底泥于 1 L 蓝口瓶中，加入 200 mL 人

工海水(底泥含水率控制在 60%~70%)、氯化汞(底泥干重的 0.15%)和 1 片洁净的 PDMS 薄膜.

置于振荡器上连续振荡 28 d(20 ℃，200 r · min-1)以达到平衡.设置 1 个空白对照，每

个浓度梯度设置 2 个平行.

实验结束后，用镊子将 PDMS 薄膜取出，用超纯水洗净后置于铝箔上晾干，再用 15 mL

丙酮/正己烷(V/V，1 ∶ 1)超声萃取 2 次，将 2 次萃取液混合后旋转蒸发浓缩至 2~3 mL，

用柔和的氮气吹至近干，乙腈定容至 1 mL，待测.