改性竹炭颗粒的制备：先将竹炭颗粒用蒸馏水清洗 3 次，去除粉尘和残留物，再置于

105 ℃烘箱中 6 h 烘至恒重，过 30~40 目筛，最后放入 600 ℃马福炉中煅烧 2 h，冷却后置

于干燥器内备用.

2.1.2 菌种与培养基

菌种为本课题组实验室前期从福建某炼油厂筛选分离的威尼斯不动杆菌

(Acinetobacter venetianus)，其最佳降解条件为：温度 30 ℃，氮源(NH4NO3)0.1 g · L-1，

pH=7.0.

无机盐培养基：K2HPO4 1 g，KH2PO4 1 g，NH4NO3 1 g，MgSO4 0.3 g，CaCl2 0.03 g，

FeSO4 0.005 g，ZnSO4 0.002 g，MnSO4 0.0002 g，蒸馏水 1 L，pH 值为 7.0.Luria-Bertani(LB)

培养基：蛋白胨 10 g，酵母膏 5 g，NaCl 10 g，蒸馏水 1 L.以上所有培养基均经 121 ℃灭

菌 20 min 后使用，微量元素于灭菌前加入.柴油培养基：无机盐培养基，十四烷 50 mg ·L-1.

2.2 实验方法

2.2.1 菌液的制备

从固体培养基斜面上挑取一环菌落，接种到 10 mL 新鲜的 LB 液体培养基，30 ℃培养

24 h.再按 1%(体积比)的接种量转接到新鲜的 LB 液体培养基，培养 12 h.将培养液转移到

50 mL 离心管中，6000 r · min-1 离心 5 min，弃去上清液，再用无菌水冲洗离心，如此

重复 3 次，加入无菌水调到波长 600 nm 处 OD600 值为 0.7 的菌悬液备用.

2.2.2 固定化菌体的制备

称取 0.5 g 改性竹炭颗粒，经高温灭菌后加入到含 15 mL 无机培养基的 50 mL 锥形瓶中，

再按 1.5%体积比加入菌液，于 30 ℃、150 r · min-1 恒温振荡箱中培养 1 d，直到菌株固

定在竹炭颗粒上. 固定化后的竹炭颗粒用无菌水冲洗 3 次去除表面的游离菌，制得改性竹炭

固定化 Acinetobacter venetianus(Liu et al.，2012).

2.2.3 柴油去除实验

将固定化菌体过滤后，加入到 50 mL 含柴油浓度为 100 mg · L-1 的无机盐培养基，放

于恒温振荡箱，30 ℃、150 r · min-1 下避光培养，分别在 0、12、24、36 、48、60、72、

84、96 h 时取样测定培养基中柴油的残留量.分别以游离菌和改性竹炭作为对照，每个处理

平行 3 次.

2.2.4 固定化菌体对不同浓度柴油的去除及吸附-降解动力学分析