第

３０卷第３期２００７年３月

环境科学与技术

始菌液，再对它进行适当的稀释，取

１ｍＬ涂布分离平

板，

３０℃培养４８ｈ，将生长的菌落接种至斜面保藏培养

基，

供纯化分离使用。

１．７纯化分离培养基

纯化分离固体培养基：

酵母膏

４ｇ，

葡萄糖

４ｇ，

Ｋ

２

ＨＰＯ

４

１．５ｇ，

ＫＨ

２

ＰＯ

４

０．８ｇ，

微量元素

０．３ｇ，

琼脂

２０ｇ，

废水

１０００ｍＬ，

调节

ｐＨ为７．０，１２０℃蒸汽灭菌２０ｍｉｎ，灭菌后待用。

纯化分离液体培养基：

酵母膏

４ｇ，

葡萄糖

４ｇ，

Ｋ

２

ＨＰＯ

４

１．５ｇ，ＫＨ

２

ＰＯ

４

０．８ｇ，微量元素０．３ｇ，废水１０００ｍＬ，调节ｐＨ

为

７．０，１２０℃蒸汽灭菌２０ｍｉｎ，灭菌后待用。

１．８高效菌的分离

挑取一环新鲜斜面种子，接入

２５０ｍＬ上述发酵

培养基中，

３０℃，１５０ｒ／ｍｉｎ的条件下培养，培养２￣３ｄ，

再对它进行适当的稀释，取

１ｍＬ涂布分离平板，３０℃

培养

４８ｈ，４￣５ｄ为一个周期。反复４￣５个周期获得较

纯的菌株。

１．９主要分析方法

ＣＯＤ，ＳＳ分别按ＧＢ１１９１４－８９及ＧＢ－Ｔ７４９８８进

行测定。

ｐＨ值采用ＰＨＳ－２５型酸度计进行测定，生物

量的测定用分光光度法，

７５１型紫外可见分光光度计

测

ＯＤ

６００

。

２实验结果与讨论

２．１菌种筛选

从广东某废纸造纸厂废水站取出的生物膜，对生

物膜上的微生物进行分离筛选工作，在驯化

５个周期

后，

得到

２株菌株。采用形态学观察和生理生化试验进

行鉴定

［８］

，

结果初步表明

１＃为动胶菌属（Ｚｏｏｇｌｏｅａｓｐ．），

２＃为假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐ．）。如表２所示。

表

２两株菌的特征、形态及生理生化实验

将上述

２株菌按１∶

１的比例混合，组成高效菌株，

待用。

２．２菌株的生长

使用高效菌株，以废纸造纸废水为唯一的碳。在

３０℃，１５０ｒ／ｍｉｎ的条件下培养７２ｈ，每间隔４ｈ取一次
样，在

６００ｎｍ下用紫外分光光度计测其吸光度值（ＯＤ

值），

结果如图

２所示。

从图

２可以看出，接种后的０￣１２ｈ为隐晦期，

１２￣３２ｈ为对数生长期，３２￣６０ｈ为稳定期，之后进入
衰退期。不同阶段处理效果不同，因此正确控制菌群

的生命活动对废水处理尤为重要。若要将高浓度有

机废水快速处理到一定的水质（非排放水），采用生

长率上升阶段（指数期）的菌体进行运转；一般活性

污泥法处理废水（达到排放水标准）则采取菌体在生

长率下降后期（稳定期后期）、衰亡期前期进行运转，

这样处理一定浓度的有机物水体，水质净化较快，出

水水质好。
２．３菌株对废水ＣＯＤ的去除效果

将高效菌株和普通菌株（直接从生物接触氧化池

中生物膜上筛出）分别接入以废纸造纸废水为唯一碳

源的液体培养基中，

在相同的条件下培养

４８ｈ。期间间

隔

４ｈ取样，４０００ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，取离心上清液测定

其

ＣＯＤ值，结果见图３。

从图

３中可以看出，对于高效菌，ｌｄ后ＣＯＤ的去

除率已经达

５５％，到第２天达到８０％以上，高效菌的

ＣＯＤ去除效果明显高于普通菌。高效菌种适应环境
的能力更强，当高效菌处于对数生长期末期和稳定期

时对

ＣＯＤ去除能力大幅度提高。原因可能是这个期

间菌株产酶能力较高，能够大量的降解有机物，另一

方面可能是微生物能及时地利用降解有机物代谢产

生的聚

－ β－羟基丁酸，避免因聚－ β－羟基丁酸的累积

而降低降解有机物的能力。
２．４挂膜连续运行

将发酵的高效菌接种于生物接触氧化池中，连续

运行，

每天测定出水的

ＣＯＤ，结果如图４。

从图

４中可以看出，在挂膜前期ＣＯＤ的去除率

菌株

１＃

２＃

菌落的颜色及形态

黄色不透明，有皱褶

乳白圆形，

扩展型

菌体形态

短杆，

无芽孢，

极生鞭毛

短杆成对，

极生鞭毛

肉汤培养液

氧化产酸不产气

发酵产酸产气

葡萄糖利用

有菌膜

浑浊

革兰氏染色

－

吲哚实验

＋

Ｖ．Ｐ反应

＋

ＮＯ

３

－

还原

－

＋

甲基红实验

＋

－

７４

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