实验组: 

 

子宫内膜增殖症 30 例, 

 

非典型增生内膜 30 例, 子宫内膜癌 90 例。子宫内膜癌组年

 

龄 34～76 岁, 

 

中位年龄 62

 

岁。Ⅰ期 46 例, Ⅱ

 

期 21 例, Ⅲ

 

期 20 例, Ⅳ

 

期 3 例; 按组织学类

型分, 

 

子宫内膜样腺癌为 86 例, 

 

腺鳞癌 3 例, 

 

浆液性乳头状腺癌 1 例; 

 

有淋巴结转移 17 例, 

 

无淋巴转移 73 例; 高、中、低分化(G1, G2, G3)   

各 30 例。

对照组: 

 

增生期和分泌期宫内膜各 15 

 

例。所有标本经 10%甲醛常规固定, 石蜡包埋。所有

诊断均经病理证实。试剂: 

 

单克隆抗体 Ki67   

及 SP 试剂盒均由广州中山公司提供。

1.2 方法

 

免疫组化采用 SP 法, 取石蜡标本, 4μm 连续切片后, 先经病理确认, 再常规脱蜡到水, 3%双

 

氧水温孵育 10min、水洗, 热修复(0.01M pH7.4 EDTA) 后降至室温水洗, 0.05M PBS 浸泡 
2min, 10%正常血清封闭, 

 

滴加一抗 Ki67 工作液 1:50, 4℃孵育过夜后升至室温, 0.05M PBS 

 

洗 3 次, 

 

每次 5min, 滴加二抗(生物素标记)   

在 37℃

 

孵育 35min, 0.05M PBS   

洗 3 次, 每次 

5min, 二氨基联苯胺(DAB) 

 

显色 5min, 自来水充分水洗, 

 

苏木素对比染色 10min, 水洗返兰 

30min, 

 

脱水后封片。以 PBS 代替一抗作阴性对照, 已知阳性组织片作阳性对照。

1.3 判断标准
Ki67 阳性应为核境界清晰的棕色、棕褐色颗粒, 

 

每张切片随机计数 5～10 

 

个高倍视野 1 

000 

≤

个细胞中阳性细胞所占百分比。 5%为- , 6%～25%为+(  

图 1), 26%～50%为++(  

图 2), 

≥51%为+++(

 

图 3)。

1.4 统计学方法

 

采用 SPSS 

 

统计软件包进行 χ2 检验。P<0.05 为差异有显著性。

2 结果
2.1 Ki67 抗原在正常子宫内膜及不同病变组织中的表达
Ki67 抗原表达呈现子宫内膜癌>非典型增生>增殖症>正常增殖期内膜>正常分泌期内膜。

 

见表 1。
*
2.2 Ki67 抗原表达与子宫内膜癌的关系

 

子宫内膜癌中 Ki67 阳性率与子宫内膜癌的病理组织分化程度、临床分期、淋巴结转移密切
相关(P<0.01)。见表 2。
*

 

图 1 

 

免疫组化 Ki67 染色阳性(+) , 

 

标记在细胞核内免疫组化 SP 法×200

 

图 2 

 

免疫组化 Ki67 染色阳性(++) , 

 

标记在细胞核内免疫组化 SP 法×200

 

图 3 

 

免疫组化 Ki67 染色阳性(+++) , 

 

标记在细胞核内免疫组化 SP 法×200

3 讨论
肿瘤的生长是一个复杂而有序的多阶段生物学过程。Ki67 被认为是癌变人群高危个体的
生物学标志物之一[1]。Ki67 即细胞核相关抗原, 是增殖性细胞核的标记物, 仅分布于细胞
核内, 

 

它出现在除 G0

 

期和 G1 期所有细胞周期中的特异性非组化蛋白, 与细胞的合成代谢

有关[2]。它表达于增殖细胞中, 在静止细胞中很少表达, 它在子宫内膜病变的发生发展中起
到重要的作用。

 

肿瘤增殖活性 Ki67 的检测对于判断肿瘤的恶性程度, 预见其生物学行为有重要的意义 。
ertens[3]报道, 由于卵巢激素的周期性变化, 使子宫内膜亦出现周期性变化, Ki67 在增生期
内膜中有表达, 

 

而在分泌期内膜表达则显著减少。在卵巢肿瘤中 Ki67 与卵巢肿瘤良恶性, 

组织学分级及预后有关[4]

 

。还有人认为 Ki67 在卵巢肿瘤组织中随组织学分级、临床分期

的升高而增加, 与卵巢癌组织大小呈正相关, 与淋巴结转移无关[5]

 

。而在胰腺癌中 Ki67 标

记指数与组织分级, 临床分期, 淋巴转移密切相关[6]。近年来,Ki67 主要用于观察恶性肿瘤
的生长, 在良性听神经肿瘤中也有该指标的表达, 且与其生长指数成正相关, 与病程成负相