1.2.1 菌落分离

稀释平板菌落计数法，

参照文献

[6]

。

1.2.2 微生物培养及观察

好氧细菌：

35～37℃，

培养 2- 3d，观察计数；

芽孢杆菌：80℃，10min 加热处理菌悬液后，涂布平板，

35～37℃，

培养 2～3d，观察计数；

酵母菌：

25～28℃，

培养 2～3d，观察计数；

霉菌：

30℃，

培养 5～7d，观察计数；

放线菌：

28℃，

培养 3～5d，观察计数。

1.2.3 分离效果的评价

主要从菌落数量、形态类别、单离效果等指标进行判断。

结果及讨论

2.1 细菌用培养基的微生物分离培养

细菌在牛肉膏蛋白胨培养基、改进牛肉膏蛋白胨培养基、

增强梭菌培养基、改进梭菌培养基的分离培养情况见表 1 和

表 2。所有的平板采用同一菌悬液稀释度 (10

- 2

) 及涂布量

(0.2mL)进行培养和计数，

实验中采用的是枝江酒业股份有限

公司出窖的糟醅、窖泥。从统计结果上看，添加浸提液对两类

细菌，

在菌落数量和菌落类别上都没有什么特别的优势，虽然

个别菌落生长较快较好，

但是一些菌落的较快生长，反而使单

离效果变差。

另外，对芽孢杆菌培养效果较好的增强梭菌培养基与牛

肉膏蛋白胨培养基比较，

在芽孢杆菌的统计上，

没有表现出更

好的培养及分离效果；虽然个别菌落在增强梭菌培养基上表

现出不同的菌落形态，但是转接到牛肉膏蛋白胨培养基上也

能得到同等程度生长的菌株，

只是菌落形态上有些差异。比较

而言，牛肉膏蛋白胨培养基对好氧细菌和芽孢杆菌都能达到

较好的培养及分离效果，因此采用牛肉膏蛋白胨培养基作为

浓香型白酒糟醅和窖泥中分离培养一般性细菌的培养基是可

行的。

2.2 酵母菌用培养基的微生物分离培养

酵母在 YPD 培养基、麦芽汁培养基、麦氏琼脂培养基和

酯化酵母培养基的分离培养情况见表 3 和表 4。所有的平板

采用同一菌悬液稀释度(10

- 2

)及涂布量(0.2mL)进行培养和计

数，实验中采用的是枝江酒业股份有限公司出窖的糟醅、窖

泥。从实验结果可以看出，4 种培养基对糟醅和窖泥中的酵母

菌的培养及分离效果，明显以 YPD 培养基为好，YPD 培养基

在分离酵母的菌落数量上高于麦芽汁培养基、麦氏琼脂培养

基和酯化酵母培养基，4 种培养基在分离酵母的菌落类别上

相差不大，因此从酵母的生长菌落数及单离效果上来看，YPD

培养基为最好，可见采用 YPD 培养基对浓香型白酒糟醅和窖

泥中的酵母菌能达到最好的分离培养效果。

2.3 霉菌用培养基的微生物分离培养

霉菌在淀粉培养基、察氏培养基、PDA 培养基和豆芽汁

培养基的分离培养情况见表 5 和表 6。所有的平板采用同一

菌悬液稀释度(10

- 2

)及涂布量(0.2mL)进行培养和计数，实验中

采用的是枝江酒业股份有限公司出窖的糟醅、窖泥。从实验结

果可以看出，淀粉培养基和豆芽汁培养基对霉菌的培养及分

离效果较好，部分霉菌在豆芽汁培养基上可能由于营养不充

足而长势较差，造成菌株在形态生长上不太分明，给分类统计

增加了困难，

但从霉菌的生长菌落数、菌落类别数以及单离效

果综合而言，以淀粉培养基为最好，且受细菌生长的干扰较

牛肉膏蛋白胨培养基
改进牛肉膏蛋白胨培养基(浸液 5%)
改进牛肉膏蛋白胨培养基(浸液 10%)
改进牛肉膏蛋白胨培养基(浸液 15%)
改进牛肉膏蛋白胨培养基(浸液 20%)
增强梭菌培养基
改进梭菌培养基(浸液 5%)
改进梭菌培养基(浸液 10%)
改进梭菌培养基(浸液 15%)
改进梭菌培养基(浸液 20%)

70～75
68～73
68～73
65～70
60～65
70～75
65～70
63～68
62～67
60～65

3～4
3～4
3～4
3～4
3～4
3～4
3～4
2～3
2～3
2～3

较好
较好
较好
一般
一般
较好
一般
一般
一般
一般

55～60
52～57
50～55
48～53
46～51
50～55
50～55
48～53
46～51
45～50

2～3
1～2
1～2
1～2
1～2
2～3
1～2
1～2
1～2
1～2

较好
一般
一般
一般
一般
一般
一般
一般
一般
一般

对好养细菌的分离效果

对芽孢杆菌的分离效果

培养基类型

数量（个 / 平板）类别（种 / 平板）

单离效果

数量（个 / 平板）类别（种 / 平板）单离效果

表 1

细菌用培养基对糟醅中细菌的分离培养效果

70～75
68～73
65～70
63～68
62～67
68～73
65～70
65～70
63～68
60～65

3～4
3～4
3～4
3～4
3～4
2～3
2～3
2～3
2～3
2～3

较好
较好
一般
一般
一般
一般
一般
一般
一般
一般

55～60
48～53
46～51
45～50
45～50
50～55
48～53
45～50
45～50
42～47

2～3
2～3
1～2
1～2
1～2
2～3
1～2
1～2
1～2
1～2

较好
一般
一般
一般
一般
一般
一般
一般
一般
一般

对好养细菌的分离效果

对芽孢杆菌的分离效果

培养基类型

数量（个 / 平板）类别（种 / 平板）

单离效果

数量（个 / 平板）类别（种 / 平板）单离效果

表 2

细菌用培养基对窖泥中细菌的分离培养效果

游

剑，等：

浓香型白酒窖池微生物分离培养基的选择研究

第一期

2009

· 63 ·