background image

  

 

 一、

 实验原理

  超氧化物歧化酶

(superoxide dismutase,SOD)在生物体内广泛分布,能催化超氧

阴离子自由基

(O2-.)发生歧化反应,从而清除氧自由基,起到防御氧毒、抗辐射、抗衰老等

作用。

  目前因

SOD 来源不同测活方法非常多,但是所测酶活结果相差较大、活性单位也不统

一。因此,本方法是针对植物型

SOD 对肾上腺素自氧化法的各种影响因素进行了研究, 建

立一种微量、快速、稳定重复性好且适用于植物来源的

S O D 测定方法。

  因植物来源的

SOD 成分比较复杂,且有微量的多酚抗氧化物成分。肾上腺素是多酚衍

生物,在碱性条件下会自动氧化,其中涉及到

(O2-.)的链式反应,可被 SOD 抑制,肾上腺

素经多步转化为肾上腺素红。肾上腺素红有

480 nm 和 320nm 两个吸收峰。325 nm 处的

吸收更能灵敏地反映自氧化程度。当

pH>10.2,线性范围缩短,pH 值越高线性范围越

;pH<10.2 时吸光度值极小,易带入误差。pH10.2 维持着良好的线性段,而且斜率适中,

可作为实际应用中的最佳

pH。温度在 30℃左右,线性关系较好。随着肾上腺素浓度的增加,

自氧化速率增大,线性范围增加,当肾上腺素浓度为

0.4 mmol/L 使每 1 min 自氧化速率

0.070,提高了灵敏度、减少了误差。

 

 二、

 实验材料及用具

 

 

1、实验试剂