品，造成环境污染等。为此，自上世纪

60 年代开始，世界各地的科学家都致力于简化该生产路线的研

究。

[1,20,21]

其合成路线如图

1。

图

1. 莱氏合成路线

新二步发酵法（相对于二步发酵法而言，将在后面对二步发酵法进行介绍）也称葡萄糖串联发酵

法，是由

D-葡萄糖依次经欧文氏菌、棒杆菌发酵生成维生素 C。该法工序简单，但在原料和菌体处理等

方面均有待改进提高，尚未能应用到工业生产中去。

一步发酵法是在新二步发酵法的基础上，利用生物技术，采用重组

DNA 技术，构成工程菌，实

现从

D-葡萄糖到 2-KGL 的一步发酵。

[1]

目前，该方法尚处于研究之中。

1.2 山梨醇发酵

山梨醇发酵上世纪

70 年代初，我国的尹光琳等发明了二步发酵法的新工艺，它是目前唯一成功

应用于

VC 工业生产的微生物转化法

[1]

，是通过生物发酵得到

2-酮-L-古洛糖酸，这有别于莱氏合成法

中的化学合成，其发酵成分较莱氏合成法更多。

[20-22]

其发酵路线如图

2（仅为发酵过程的一部分，其余

过程与莱氏法相同）。

图

2. 二步发酵法发酵路线

本文将以

D-葡萄糖为开端，重点介绍二步发酵生产维生素 C 的过程，其中包括菌种的培育、菌种

的保藏、种子的制备、发酵动力学、发酵环节的控制和染菌及防治等方面的内容。

2 菌种的培育

二步发酵生产维生素

C 过程中用到的菌系为混合菌系

[23]

，包含的发酵菌种类很多，这里将主要介

绍巨大芽孢杆菌菌种的培育。（由于生黑醋杆菌的相关资料查不到，这里就不进行论述了，可以考虑从

相关机构或科研院所直接获取现成的生黑醋酸杆菌，这也是获取菌种的一种方法）。

2

说明：
目前生
产中假
单孢杆
菌已被