℃、40 ℃、50 ℃、60 ℃的条件下超声提取 30 min，由图 3 可知，30 ℃~50 ℃时对黄柏总生
物碱的提取率影响总体并不显著，在
60
℃时提取率最大，因此在试验中均采用 60 ℃。见
图
3。
2.1.3 料液比对提取率的影响 精密称取黄柏药材 1 g，加入 70%浓度的乙醇，料液比分
别为
10
∶1、20∶1、30∶1、40∶1、50∶1，于温度 60 ℃超声提取 30 min，由图 4 可知，料液比高于
30
∶1 时 盐 酸 小 檗 碱 的 提 取 率 有 所 下 降 ， 在 30∶1 时 提 取 率 最 大 ， 因 此 本 试 验 选 取
10
∶1、20∶1、30∶1 这 3 个梯度作为考察对象。见图 4。
2.1.4 超声时间对提取率的影响 精密称取黄柏药材 1 g，加入 70%浓度的乙醇，料液比
30
∶1 于 60 ℃超声提取 10、20、30、40 min，由图 5 可知，超声 30 min 时盐酸小檗碱的提取率
最大，超声
30 min 时提取率最大，因此本试验选取 25 min、30 min、35 min 这 3 个梯度作为
考察对象。见图
5。
2.2 因 素 水 平 设 计 采 用 L9 （ 34 ） 正 交 表 设 计 实 验 ， 以 乙 醇 - 水 为 提 取 液 ，
SDS、CTAB、TW60 考察活性剂，以盐酸小檗碱含量为考察指标，考察醇浓度、活性剂种类、
料液比、提取时间等因素对盐酸小檗碱提取率的影响，因素水平见表
1，正交试验结果及方
差见表
2、表 3。
由表 2、表 3 实验结果可知，各因素对川黄柏总生物碱提取率的影响大小顺序为 B（活
性剂）
>C（料液比）>A（乙醇浓度）>D（提取时间），最佳工艺条件为 A3B3C3D2，方
差分析结果表明，因素
B 对黄柏总生物碱有显著性影响，因素 A、D 各水平间无显著性差异。
即最佳工艺为：
80%乙醇，活性剂为 TW60，料液比为 30
∶1，超声 30 min。
2.3 对比性实验 见表 4。
对比试验结果说明最优化条件提取率高于未加活性剂条件下的提取率，同时远高于回
流法，高于文献值
6.37%［7］，由此可见，采用表面活性剂法能明显提高黄柏中生物碱的
提取率。
3 讨论
从黄柏中提取生物碱的最佳方法为：
80%乙醇，活性剂为 TW60，料液比为 30
∶1，超声
30 min，最优先条件提取率高于未加活性剂条件下的超声提取率，同时远高于回流法。
超声波的强烈振动，有利于溶剂渗透到药材粉末之中，加速生物碱成分的溶出和扩散
对黄柏生物碱提取率有一定的提高，表面活性剂对黄柏生物碱亦有一定的增溶效果，两者
结合考虑，对生物碱提取率有更大的提高。
关于盐酸小檗碱的含量测定，实验中曾取供试品和对照品溶液在
waters 液相通过 DAD
多波长检测器检测，发现
200～400 nm 波长范围内，两者均在 345 nm 波长处有最大吸收，
且为单峰，故采用
345 nm 紫外分光光度法定量。
参考文献：
［
1］国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，
2010：286~287.
［
2］陈蕾，邸大琳.黄柏体外抑菌作用研究［J］.时珍国医国药，2006，17（5）：
759~760.
［
3］王浴生，邓文龙，薛春生.中药药理与应用［ M］.北京：人民卫生出版社，
2002：1024~1026.
［
4］徐小龙.生物碱的提取与分离纯化技术［ J］.江西科学， 2009：27（3）：
472~476.
［
5］刘普和.医学物理学［M］.北京：人民卫生出版社，1980：850.
［
6］钟静芬，李文兰.表面活性剂在秦艽生物碱提取分离中的应用［J］.甘肃医药，
1992，11（5）：292~294.