2.1 提取工艺流程 

　　准确称取山楂粉末

5 g，加入一定质量分数的表面活性剂水溶液进行回流提取，合并浸

提液，浓缩得黄酮提取液。

 

　　

2.2 标准曲线的制备 

　　准确称量芦丁标准品

0.003 8 g，加 60％乙醇溶解并定容至 50 ml。精密量取标准储备液

0、1、2、3、4 ml，分别置于 10 ml 刻度管中，加 5%亚硝酸钠溶液 0.5 ml，放置 5 min，加 10%
硝酸铝溶液

0.5 ml，摇匀后放置 6 min，加 1 mol/L 氢氧化钠溶液 4 ml，再加 60%乙醇定容

至

10 ml，以相应试剂为空白，在 508 nm 波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横

坐标，绘制标准曲线，得回归方程为

Y=0.049 6X+0.000 4，r=0.999 6（n=6）。实验结果表

明芦丁浓度在

7.6～30.4 μg/ml 与吸光度（λ=508 nm）线性关系良好。 

　　

2.3 单因素试验 

　　选定

5 个因素即表面活性剂、提取次数、提取时间、提取温度、料液比研究其对总黄酮提

取率的影响。

 

　　

2.3.1 表面活性剂对吸光度的影响称取山楂 5 g，加入 10 倍量质量分数为 1%的不同表

面活性剂，

80

℃回流提取 1 h，提取 1 次，见表 1。由表 1 可知，同样条件下，所采用的表

面活性剂中，以吐温

80 提取效果最好，故选择吐温 80 作为该工艺研究中使用的增溶剂。按

照上述方法，以吐温

80 为增溶剂考察吐温 80 质量分数对于山楂黄酮提取率的影响，结果

见图

1。由图 1 可知，当吐温 80 质量分数在 2%左右时，黄酮提取率最大。因此， 选择吐温

80 质量分数为 1%～2%作为进一步优化范围。 
　　

2.3.2 提取时间对吸光度的影响称取山楂 5 g，加入 10 倍量质量分数为 2%的吐温 80 水

溶液，

80

℃回流提取 1 次，见图 2。由图 2 可以看出，随着提取时间的增加，吸光度呈先增

大后减小的趋势。综合考虑，选择提取时间

1～2 h 进一步优化范围。 

　　

2.3.3  料液比对吸光度的影响称取山楂 5 g，加入质量分数为 2%的吐温 80 水溶液，

80

℃回流提取 1 次，回流提取 2 h，见图 3。从图 3 可以看出，随料液比的增大，吸光度增

大。本着节约原则，选择料液比

1

∶20～1∶40 作为提取黄酮的考察条件。 

　　

2.3.4 温度对吸光度的影响称取山楂 5 g，加入 30 倍量质量分数为 2%的吐温 80 水溶液，

回流提取

1 次，提取 2 h，见图 4。从图 4 可以看出，随温度的升高，吸光度增加。选择提取

温度

80～100

℃作为提取黄酮的考察条件。 

　　

2.3.5 提取次数对吸光度的影响称取山楂 5 g，加入 10 倍量质量分数为 2%吐温 80 水溶

液，

80

℃回流提取 1 h，见图 5。从图 5 可知，随着提取次数的增加，提取率增加，但是提

取

2 次后，增加的不明显。本着节约原则，选择提取 2 次。 

　　

2.4 正交试验 

　　因各因素之间存在相互影响，为了获得最佳工艺条件，利用正交

“均匀分散”的特点，

以温度、吐温

80 质量分数、料液比为主要考察因素，以测得的浸提样品中黄酮含量为主要考

察指标，根据单因素试验结果设计因素水平如表

2 所示。选用 L9（34）正交表，试验结果

如表

3、4 所示。 

　　由表

3、4 正交试验和方差分析结果得，表面活性剂提取山楂黄酮的最佳工艺条件为：

提取温度为

90

℃，吐温 80 质量分数为 1.5%，提取时间为 1 h，提取 2 次，料液比为 1∶20。 

　　

2.5 对比试验 

　　取同一批山楂粉末

6 份。根据优化工艺条件，对 3 份山楂粉末进行总黄酮提取。另取 3

份按单纯回流提取法

[6]（加 20 倍量 75％乙醇提取 1 h，提取温度 90

℃）提取 2 次，分别计