本实验对水蒸汽蒸馏法提取迷迭香精油工艺进
行筛选研究,以精油提取率、精油中 α-
蒎烯、1,8-
桉
叶素含量为指标,筛选出最佳提取工艺。 在以上研
究基础上开发以迷迭香精油为主要成分的复方精油
产品,用于海南熏香产业。
1 仪器与试药
1.1 仪器
挥发油提取器,电子调温电热套( 天津市泰斯
特仪器有限公司)、116 摇摆式粉碎机(海南佳惠食
品机械厂)、
YP3001N 型电子天平(上海舜宇恒平科
学仪器有限公司),
AUW220D 型十万分之一电子天
平(日本岛津公司)、圆底烧瓶(5 000
mL)、球形冷凝
管、
GC-14C 型气相色谱(日本岛津公司)。
1.2 试药
α-
蒎烯对照品( 中国药品生物制品检定所,批
号 897-
200001),1,8-
桉叶素对照品( 中国药品生物
制品检定所,批号 88-
200903);
迷迭香购于海南凤
生香草园,经鉴定为唇形科迷迭香属植物迷迭香
Rosmarinus officinalis L.的新鲜枝叶;无水乙醇(分
析纯)。
2 方法与结果
2.1 迷迭香不同处理方式的考察
迷迭香按新鲜、50 ℃烘干和晾干等 3 种不同方式
处理后进行挥发油提取,考察其出油率,新鲜迷迭香的
出油率按 50 ℃烘干后的药材计算。 结果见表 1。
表
1 不同方式处理的迷迭香提取
处理
方式
药材用量
(
g)
加水量
(
倍量)
提取时间
(
h)
挥发油量
(
mL)
出油率
(
mL/100 g)
新鲜
400
8
l
4
梃
3
6
.
5
2
构
.
35
50℃
烘干
100
12
儍
4
梃
2
6
.
3
2
构
.
30
晾干
150
12
儍
4
梃
3
6
.
3
2
构
.
20
注:新鲜迷迭香 50 ℃烘干 后,其 失水率 为 62.7%;经晾干 后的失
水率为 66.3%。
结果表明,迷迭香经不同方式处理后提取挥发
油的出油率,除晾干的有所降低外,变化不大。 结合
实际情况,选取 50 ℃烘干方式处理的迷迭香进行水
蒸汽蒸馏提取工艺的筛选试验。
2.2 正交试验
2.2.1 正交试验因素水平的确定 取烘干的迷迭香
药材 100
g,以粉碎度、加水量(倍量)、提取时间为
考察因素, 每个因素设计 3 个水平 ( 表 2), 按
L
9
(3
4
)
正交表安排实验。 制备 9 组实验条件下的药
材。
表
2 因素水平表
水平
因素
药材粉碎度
A
加水量
B(倍)
提取时间
C(h)
1
f
不粉碎
10
妹
1
2
f
粗粒(剪成 1
cm 长)
20
妹
2
3
f
粗粉 ( 过 14 目 筛 不 过 40 目
筛)
30
妹
4
2.2.2 挥发油的测定 按中国药典(2010 版)附录
X D 挥发油测定法(甲法) 测定每组试验的挥发油
量。 结果见表 3。
2.2.3 α-蒎烯、1,8-桉叶素含量测定 (1)气相色
谱条件:色谱柱为
SE54 毛细管柱,载气为氮气,FID
检测器,采用二阶程序升温,从 50 ℃升温至 130 ℃,
以每分钟 5 ℃的速度升温;再从 130 ℃升温至 250 ℃,
以每分钟 10 ℃的速度升温,进样口温度 250 ℃,检测
器温度为 280 ℃,进样量 1 μ
L。 (2)内标物溶液的配
制:精密称取 1.
073
g 十八烷,置 100 mL 容量瓶中,加
无水乙醇超声溶解,并稀释至刻度,摇匀。 内标溶液
浓度为 10.73
mg/mL。 (3)对照品溶液的配制:α-蒎
烯对照品溶液:精密称取 α-
蒎烯对照品 0.
068 35
g,置
10
mL 容量瓶中,加无水乙醇定容至刻度,摇匀,α-蒎
烯对照品溶液浓度为 6.
835
mg/mL。 1,8-桉叶素对照
品溶液:精密称取 1,8-
桉叶素对照品 0.
066 50
g,置10
mL 容量瓶中,加无水乙醇定容至刻度,摇匀,桉油精
溶液浓度为 6.
650
mg/mL。 对照品工作溶液:分别精
密吸取内标物溶液、α-
蒎烯对照品溶液和 1,8-
桉叶素
对照品溶液各1.
00
mL,置 10 mL 容量瓶中,用无水乙
醇定 容 至 刻 度, 摇 匀。 其 浓 度 分 别 为 十 八 烷
1.
073
mg/mL、α-蒎烯 0.683 5 mg/mL、1,8-桉 叶 素
0.
665
mg/mL。 (4)供试品溶液的配制:分别称取 9
份样品适量,置 10
mL 容量瓶中,再分别精密加入内
标物溶液 1.
00
mL,加无水乙醇定容至刻度,摇匀,即
得供试品溶液。 (5)测定法:分别精密吸取上述供试
品溶液及对照品工作溶液各 1 μ
L,注入气相色谱仪,
测定结果见表 3。
2.2.4 综合指标的计算 实验结果采用综合加权评
分,即出油率
H(权重系数 0.7)、α-蒎烯 M(权重系数
0.
15)、1,8-
桉叶素
N(权重系数 0.15)来分析。 由于
三个指标的单位的不同,所以各指标采用相对值进行
加权综合评分。 即按公式
W
j
=
H
j
/
H
max
×0.
7 +
M
j
/
M
max
×0.
15 +
N
j
/
N
max
×
0.
15
计算。
J:试验号。 结果见表 4。
9