武汉大学学报

(医学版)

第

26 卷

0 .01). Conclusion:T he intense of expression of M M P-9 and TI MP-1 was observed in tumor cells
and stroma cells differently;its expression was significantly stronger in the invasive front than

that in the center of tumor,w hich indicated that tumor cells in invasive Matrix Metalloproteinase
front has stronger potentialities of invasion in OSCC .

Key Words   O ral Squamous Cell Carcinoma;Invasive Tumor Front;Matrix Metalloprotein-

ase-9;T issue Inhibitor of M etalloproteinase-1

    基质 金属 蛋白 酶 (matrix metalloproteinases,

M M Ps)是蛋白水解酶中较为重要的一类,能够降解

细胞外基质

(EC M)的各种成分。 M M P-9 是 M M Ps

中相对分子 质 量 最 大 的 酶

,可以降解 EC M 中的Ⅳ

型

、Ⅴ型胶原和明胶等主要成分;组织金属蛋白酶抑

制 剂

-1 (tissue inhibitor of metalloproteinase-1,

TI MP-1)能与 M M P-9 形成复合物,抑制其活性,在

肿瘤的侵袭转移中起负性调节 作用

。实验研究表明

M M P-9 和 TI MP-1 与口 腔鳞 癌浸 润密 切相 关

[1]

。

此外

,对 于 头 颈 部鳞 癌 浸 润 前 沿 (invasive tumor

front,IT F)的结构和功能特征的研究,受到国内外
学者们 的关 注

。Bryne 等

[2]

认为 该部 分肿 瘤细胞 较

之近表面部分肿 瘤 细 胞分 化 更差

,其形态和功能特

征可更好地反映口腔癌的生 物侵袭 性

。关于 M MP-

9 和 TI MP-1 在口腔鳞癌浸润前沿部分的表达,报道

甚少

。本文 采 用 免 疫 组 化 SP 法检 测 M M P-9 和

TI MP-1 在口腔鳞癌组织中的表达,特别是浸润前沿

肿瘤细胞与癌中 央 细 胞分 别 表达

,并分析它们的意

义

。

1   材料与方法

1 .1   临床资料   54 例经病理证实的原发性口腔粘

膜鳞状细胞癌组 织 取 自武 汉 大学 口 腔医 学 院

,其中

男性

35 例,女性 19 例,年 龄 24 ～ 91 岁,平 均年龄

54 .5 岁。舌癌 30 例,颊癌 10 例,牙龈癌 9 例,腭部
3 例,口底癌 2 例。按 W H O(1997)对口腔鳞状细胞

癌的分级 标准 进行 分级

:Ⅰ级 24 例,Ⅱ级 23 例,Ⅲ

级

9 例。按 UICC 的分期标准

[3]

:Ⅰ期 13 例、Ⅱ期

12 例、Ⅲ期 17 例、Ⅳ期 12 例。
1 .2   方法   所有标本经 10% 福尔马林固定,常规石

蜡制 片

,HE 染 色。 SP 法 行 免 疫 组 织 化 学 染 色,

M M P-9 和 TI MP-1 抗体 均为即 用型 (福 州迈新 公

司

),M M P-9 免去抗原修复步骤,TIM P-1 采用枸橼

酸缓冲液高压热力 修复 抗原

,DAB 显色。用已知的

阳性片为阳性对照

,PBS 代替一抗作阴性对照。

显微镜

(在放大 400 倍下用物镜测微尺标定目

镜

)下直接对每张 HE 切片中肿瘤的浸润深度进行

测量

(由两侧正常粘膜水平至其最深层癌细胞的距离

作为浸润深度

)

[4]

。病例根据测得的浸润深度值的均

值分为

:≤6 .0 mm(29 例)和 >6 .0 mm(25 例)两组。

根据

IFG 标准

[5]

对口腔癌浸润前沿

(肿瘤宿主交界处

最前沿的

3～ 6 层肿瘤细胞或分散的细胞团

[6]

)分级

(根据生长前沿细胞的角化程度、核分裂数、核异形
性

、浸润方式、炎症细胞反应 5 项指标综合计分):IFG

总分

<10 分者 29 例,≥10 分者 25 例。

1 .3   结果判断   肿瘤细胞膜和 / 或细胞浆有棕黄色

颗粒沉着 者为 阳 性

。 M M P-9 和 T IM P-1 评分参照

Sinicrope 等

[7]

综 合 计 分 法 并 略 加 修 改 行 半 定 量 分

析

:根据细胞膜和 / 或浆的染色程度及染色细胞百分

率进行评 分

:着色淡为 1 分,着色适中为 2 分,着色

深为

3 分;着色细胞占计数细胞的百分率 <5% 为 0

分

,6 % ～ 25 % 为 1 分,26% ～ 50 % 为 2 分,>51% 为

3 分。两分相乘为其最后得分:0～ 1 分为阴性(- ),
2～ 3 分为弱阳性(+ ),4 分及以上为阳性 (),弱

阳性视为阴性

,结果分为阴性和阳性两组。

1 .4   统计学分析   应用 SPSS11 .5 统计分析软件

进行

χ

2

检验或

Fisher’s 确切概率法和 Spearman 等

级相关分析

,以 P <0 .05为差异有显著性。

2   结果

2 .1 口腔癌组织中 MMP-9 的表达(表 1)  M M P-9

在肿瘤细 胞 及 间 质 细 胞 均 呈 阳 性 表 达

(见插页 6,

图

1),肿瘤细胞 阳性表 达比 率较高 而间 质细胞 较

少

。54 例标本中,肿瘤细胞 M MP-9 阳性表达 33 例

(61 .1%),阴性表达 21 例(38 .9 %)。 M M P-9 表达
与患者性别

、年龄、肿瘤发生部位及肿瘤大小未见明

显关 系

。 浸 润 深 度 > 6 . 0 mm 的 肿 瘤 细 胞 表 达

(84 .0%)明显高于浸润深度≤6 .0 mm 者 (41 . 4% ,

P <0 .01);Ⅰ～ Ⅱ期与Ⅲ～ Ⅳ期相比表达差异有显

著性

(P <0 .01),且随分期增加呈递增趋势;W H O

病理

Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级中阳性率分别为 40 .9% ,70 .8 % 和

87 .5 % ,有 显著差异 (P < 0 .05);IFG 计 分较高 者

M M P-9 表达明显强于 IFG 计分较低者(P <0 .01)。
M M P-9 表达与浸润深度、临床分期和 IFG 计分正相

2