速、省料，特异性和敏感性与发酵法符合率高，使用时应正确掌握操作技术和判断标准，从
而达到理想的检测效果

[4]。 

　　从实用性来说，

ET 纸片省却了大量的玻璃器皿的麻烦，操作简便，携带方便，污染小；

可在野外迅速检测所采集样本，避免常规方法因运输时间长而造成的菌落环境变化，更能
反映采集样本真实菌落情况；培养后所长的为有色菌落，便于计数。

 

　　纸片法也有其弊端，测试片较小，菌量数较大时计数困难；只研制出了少数几种类型
的测试片，只能局限于几个指标的检测上。

 

　　目前，对纸片法分改进主要是扩大被检测目标菌种种类；研制具有检测较大菌量的纸
片，并且提高检测准确性。神保胜彦

[5]（1991）对纸片法作了进一步研究和改进，改进后

的纸片法不仅能够确定抗生素的种类，而且提高了检出率和准确性，氯霉素最低检出量
0.01mg/kg，土霉素 0.05mg/kg，链霉素 1mg/kg，红霉素 0.05mg/kg，青霉素 0.0025mg/kg。 
　　三、纸片法在食品微生物检验中的应用

[6] 

　　

1.菌落总数测试片，揭起覆盖的胶片，将 1ml 样品悬液滴于纸片中央后盖回，用压板

轻轻压下，将样品均匀地覆盖于培养基上。静置约

1min 使培养基中的凝胶固化。测试片水平

放于

37

℃恒温箱内培养。细菌总数测试片培养 48±3h 后计数红色菌落数作为细菌总数，亦

可用作乳酸菌测定。

 

　　

2.霉菌、酵母菌测试片，该测试片含霉菌酵母生长的营养物质、菌落生长的指示剂，并

添加抗生素以抑制细菌生长。接种后，

21

℃～25℃培养 3～5 d，计数。酵母菌菌落特征：小

型菌落，边缘清晰，颜色均一，灰白色至蓝绿色，菌落隆起。霉菌菌落特征：大型菌落，边
缘模糊，中间颜色深暗，颜色不均一，菌落扁平。

 

　　

3.大肠菌群、大肠杆菌检测纸片，该测试片含有改良的 VRB（Violet Red Bile）培养基

及葡萄糖苷酸酶指示剂。绝大多数大肠杆菌能产生

β-葡萄糖苷酸酶，与培养基中的指示剂反

应，产生蓝色沉淀环绕在大肠杆菌菌落周围，表面覆盖的胶膜，可留住发酵乳糖产生的气
体，形成蓝色和深蓝色的菌落并有气泡相连。大肠菌群菌落在测试片上产酸，

pH 指示剂使

培养基变为暗红色，在红色菌落周围有气泡者为大肠菌群。所以，一次测试即可测出大肠杆
菌和大肠菌群数：带气泡的蓝色和红色菌落为大肠菌群，带气泡的蓝色菌落为大肠杆菌。

 

　　

4.金黄色葡萄球菌测试片，该测试片含有改良的 Baird Parker 培养基，对于金黄色葡萄

球菌的生长有很强的选择性，并能将其鉴定出来，与

3 个 Baird Parker 平板加一个血浆凝固

酶试管的方法等效。其可形成暗紫色菌落，如果在测试片上有其它可疑菌落出现，可以使用
金黄色葡萄球菌确认反应片。其含有显色剂及脱氧核糖核酸，由于金黄色葡萄球菌产生的脱
氧核糖核酸酶，具有耐高温特性，高温处理后仍能将

DNA 降解而与反应片上的显色剂反

应形成粉红色环。

 　　5.沙门氏菌测试片，将选择性培养基中加入沙门氏菌特有辛酯酶的显

色指示剂，并将其加载在纸片上，通过培养，如果样品中含有沙门氏菌，即可在纸片上呈
紫红色的菌落。

 

　　四、分别用纸片法和平板计数法检验食品中的大肠菌群

 

　　

1.检验之前的准备，检验之前的准备是保证检验高质量的前提，应做好以下几点： 

　　

1.1 为了保证微生物检验的高质量，要求检验人员的要有专业知识和熟练的技术，而且

还必须具备对工作的高度责任感和实事求是的科学工作作风。确保实验室人员得到及时培训
及不断更新知识，学习和掌握新理论、新技术和新方法。

 

　　

1.2 环境，实验室应具有进行微生物检验适宜充分的设施条件，包括检测设施（专用于

微生物检测和相关活动）及辅助设施（大门、走廊、管理区、样品区、清洁间）特殊的设备要
在特殊的环境下放置和操作。所用无菌实验室应符合

GB19489[7]的规定。 

　　

1.3 操作，操作人员必须严格按照 GB/T 

　　

4789[8]食品微生物检验标准中的操作规程进行检验，做好灭菌处理，为防止二次污染