生物自身生长代谢物来鉴定细菌。

Newark 微生物鉴定系统就是用气相色谱法检测一种饱和

脂肪酸

 （微生物代谢物）的含量 ，达到检测鉴定微生物的目的。微型自动荧光酶标分析法

MINI VIDIUS 是利用酶联荧光免疫分析技术，通过抗原 -抗体特异反应 ，分离出目标菌 ，
由荧光强弱判断样品的阳性或阴性。细菌直接计数法通常以激光作为发光源

 ， 经过自动聚

焦整形后的激光光束，被荧光染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激发荧光。光散射
信号基本上反映了细胞体积的大小；荧光信号的强度则代表了所测细胞膜表面抗原的强度
或其核内物质的浓度

 ，从而计算微生物的数量。荧光分析法只能检测真核生物 ，与细胞大

小、

DNA 的数量有关 ，而这些又和培养条件以及微生物来源有关。色谱法和荧光分析法的

检测成本较高。

 

　　电阻抗法。其原理是细菌在培养基内生长繁殖的过程中，将会使培养基中的火分电惰性
物质如碳水化合物、蛋白质和脂类等，代谢为具有电活性的小分子物质，其能增加培养基的
导电性，从而使阻抗发生变化，所以我们可以通过检测培养基的电阻抗变化情况来判定细
菌在培养基中的生长繁殖特性，即可检测出相应的细菌。该法已用于霉菌、大肠杆菌等细菌
的检测。

 

　　快速酶触反应及代谢产物的检测。细菌在生长繁殖过程中可合成和释放某些特异性的酶，
所以根据其特性来选用相对应的底物和指示剂，并记录反应的结果。如美国

3MPetiffilmTM

微生物测试片可分别快速测定细菌总数、金黄色葡萄球菌等。

 

　　免疫学方法检测细菌抗原和抗体的技术。其有三种技术：

 ①荧光抗体检测技术

 

（

IFA），包括直接法和间接法。直接荧光抗体检测法是在检样上直接滴加已知特异性荧光

标记的抗血清，经洗涤后在荧光显微镜下观察结果。间接法是在检样上滴加已知细菌特异性
抗血清，待作用后经洗涤，再加入荧光标记的抗体后在荧光显微镜下观察结果。②免疫酶技
术（

EIA） 免疫酶技术是根据抗原与抗体特异性结合，以酶作标记物，酶对底物具有高效

催化作用的原理而建立的。酶与抗体或抗原结合，既不改变抗体或抗原的免疫反应的特异性
能，也不影响酶本身的酶学活性。酶标抗体或抗原与相应的抗原或抗体相结合后，形成酶标
抗体

-抗原复合物。复全物中的酶在遇到相应的底物时，催化底物分解，使供氢体氧化而成

有色物质。有色物质的出现，客观地反映了酶的存在。根据有色产物的有无及其浓度，即可
间接推测被检抗原或抗体是否存在以及其数量，从而达到定性或定量的目的。

 　　

    免疫酶技术的方法可以分为直接法和间接法。直接法 用酶标记特异性抗体，直接检测微
生物或其抗原。在含有微生物或其抗原的标本固定后，消除其中的内源性酶，用酶作标记的
抗体直接处理，使标本中的抗原与酶标抗体相结合，然后加底物显色，进行镜检。间接法

 

将含有微生物或其抗原的组织或细胞标本，用特异性抗体处理，使抗原抗体结合，洗涤清
除未结合的部分，再用酶标记的抗体进行处理，使其形成抗原

-抗体-酶标记抗体复合物理

学，最后滴加底物显色，进行镜检。间接法虽然多一步骤，但比直接法特异性强，使用范围
广。因为只要用一种酶标记一种动物的球蛋白抗体，就可以检测该种动物的任何一种抗体。
此外，酶标记第二抗体可用葡萄球菌

A 蛋白 SPA 或微生物素与亲合素系统等代替，亦成功

地用于许多抗原和抗体的检测。同时，在不同程度上提高了检测方法的特异性与敏感性。免
疫酶染色法已在动物检疫中广泛应用。③免疫磁珠分离法

 （IMS），免疫磁珠分离法的核心

是在磁珠表面包被具免疫反应性的抗体进行抗原抗体反应，在细胞表面形成玫瑰花结，这
些结合了磁珠的细胞一旦置于强大的磁场下，就会与其他未被结合的细胞分群，具超强顺
磁场的磁珠脱离磁场后立即消失磁性，这样就可以筛选或去除所标记的细胞，从而达到阳
性或阴性选择细胞的目的。即应用抗体包被的免疫磁珠，用一个磁场装置收集铁珠。

 仪器法。

①微型全自动荧光酶标分析仪（Mini-VIDAS），其主要采用具有优异的敏感性和特异性的
酶联荧光技术（

ELFA），所测的荧光与抗体中抗原的含量成正比。②全自动微生物分析系

统（

Vietk-AMS）。其可以同时对 60-480 个样品进行分析，并且鉴定时间只需 2～3h，这是