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物检验领域内,国内使用比较多的有

Reveal@大肠杆菌 O157:H7 检测系统、Reveal@沙门

氏菌检测系统及

GeneQuence@李斯特氏菌检测试剂盒、金黄色葡萄球菌乳胶凝集试剂盒等。 

  (

3)免疫磁珠技术 

  用连接抗体的磁珠捕捉增菌液中的目的菌,然后将捕捉到的抗原即目的菌划线于选择
性平板,观察菌落。或用荧光或酶标记的抗抗体进行检测。或用聚合酶链式反应技术进行进
一步检测。此技术在

ISO 166654:2001《食品和动物饲料微生物学―大肠杆菌 O157 基准检验

方法》上得到了应用。目前可利用该技术对沙门氏菌、大肠杆菌

0157、大肠杆菌 0145、大肠杆

O111 等进行测试。 

  (

4)免疫层析技术 

  该技术是一种膜固相免疫测定技术。滴加在膜一端的样品溶液受膜的毛细管作用向另一
端移动,犹如层析一般。移动过程中被分析物与固定于膜上某一区域的抗原或抗体结合而被
固相化,无关物质则越过该区域而被分离,然后通过标记物的显色来判定实验结果。以胶体
金为标记物的实验称为胶体金免疫层析技术,该技术具有简单、快速、准确和无污染等优点,
可对食品中大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、布氏杆菌、霍乱弧菌等进行检测。

 

  (

5)其它免疫技术 

  细菌直接计数法主要包括流式细胞仪

(flow cytometry,FCM)和固相细胞计数(solid 

phasecytometry,SPC)法。FCM 通常以激光作为发光源,经过聚焦整形后的光束垂直照射在
样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激发荧光。光散射信号基本上
反映了细胞体积的大小;荧光信号的强度则代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物
质的浓度,由此可通过仪器检测散射光信号和荧光信号来估计微生物的大小、形状和数量。
流式细胞计数具有高度的敏感性,可同时对目的菌进行定性和定量鉴定。目前已经建立了细
菌总数、致病性沙门氏菌、大肠埃希氏菌等的

FCM 检验方法。 

  

3.其它技术 

  即用型纸片法

 

  

3M 公司的 perrifilmTMPlate@系列微生物测试片,可分别检测菌落总数、大肠菌群计数、

霉菌和酵母计数。由

RCP Scientific Inc 公司开发上市的 Regdigel@系列,除上述项目外还有

检测乳杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌的产品。

3M 公司生产的 PF(Petrifilm)试纸还加入了染色剂、

显色剂,增强了菌落的目视效果,而且避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷。霉菌快
速检验纸片,应用于食品检验中的霉菌具有操作简便,仅需

36

℃培养,不需要低温设备;

快速,仅需

2d 就可观察结果,比现在的国家标准检验方法缩短 3~5d,大大提高了工作效

率。纸片法与国标法在霉菌检出率上差异无统计学意义,且菌落典型,易判定。

 

  二、食品微生物快速检测技术的局限性

 

  快速检测技术的评估结果表明,其对于某类食品的性能优于其他食品,很大程度上是
由于食品成分干扰所致,有些食品成分对于快速检测方法中所应用的技术是比较麻烦的。例
如在采用

PCR 技术时,食物中的高蛋白、高脂肪对 Taq 酶具有抑制作用,可能导致检测结

果假阴性。同时

PCR 操作过程要求严格,微量的外源性 DNA 进入 PCR 后可以引起无限放

大产生假阳性结果。

 

  三、结束语

 

  食品病原微生物检测是保障食品安全的重要组成部分,依靠采用培养基增菌培养、分离、
生化鉴定及革兰染色镜检等传统检测方法,对实验室技术人员的专业技术、操作技能以及工
作经验要求极高,操作步骤复杂繁琐,检测周期长,灵敏度低,准确性差,容易出现假阴
性或假阳性结果。近年来,微生物快速检测技术发展迅速,运用分子生物学、电子技术、生物
化学、免疫学等技术对微生物进行分离、鉴定和计数,与传统检测方法相比,更快、更方便、
更灵敏、更准确。