竞争法：

当小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体

夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原
竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，最后
的显色也愈浅。小分子激素、药物等 ELISA 测定多用此法。

竞争法的简要操作步骤：

1

）

先加入抗体，使抗体固定结合于载体表面；

2

）

加入梯度浓度比例的待测样品与酶标抗原混合物；

3

）

加底物，显色。

图例如下：

捕获包被法：

在 ELISA 检测中，检测使用的抗体价格都十分昂贵，并且由于抗体 Y 型的三维

结构使得抗体固定于固相载体上的效果也不好。当在检测中需要降低抗体用量
时，一般会采用捕获包被法，即把 A 蛋白或 G 蛋白先包被于固相载体表面，再加
入特异性的抗体，利用 A 蛋白或 G 蛋白能特异性结合抗体的 FC 段的特点来充分