2.3.4 菌株的生长曲线测定

将纯化后的菌株分别接种在液体富集培养基、含有 1000 mg · L-1 联苯的 MSM、含有 1

mg · L-1 PCB77 的 MSM 中，于 30 ℃和 150 r · min-1 条件下培养，间隔一定时间取 2 mL

培养液，采用紫外-可见分光光度计(UVmini-1240，SHIMADZU)测定其在 600 nm 处的吸光度

值，以此来表征培养液中菌体浓度.

2.4 高效降解菌降解率影响因素实验

2.4.1 菌液的制备

将驯化分离出的菌株接种于富集培养基中，在 30 ℃、150 r · min-1 条件下培养至对

数生长期，以 3500 r · min-1 离心 10 min，弃去上清液，用 pH7.2 的磷酸缓冲溶液洗涤

沉淀物 3 次，重悬于相同培养基中，使最终 OD600 值约为 1.0.

2.4.2 外加碳源对 PCB77 降解的影响

分别选取苯甲酸、邻苯二甲酸、联苯作为外加降解碳源.降解体系为装有 20 mL MSM 的

50 mL 三角瓶，其中 PCB77 浓度为均 1 mg · L-1.第 1 组为对照，第 2 组为 1000 mg · L-1

的联苯，第 3 组为 1000 mg · L-1 的苯甲酸，第 4 组为 1000 mg · L-1 的邻苯二甲酸.在

30 ℃、150 r · min-1 条件下培养 7 d，取样测定降解率.

2.4.3 体系 pH 对 PCB77 降解的影响

调节 MSM 的 pH 值，分别为 3、4、5、6、6.5、7、7.5、8、9，接入 2 mL(OD600=1.0)

降解菌液，控制降解体系中 PCB77 浓度为 1 mg · L-1，在 30 ℃、150 r · min-1 条件下

培养 7 d，取样测定降解率.

2.4.4 PCB77 初始浓度对降解的影响

在无菌条件下，准确移取一定量的 PCB77 母液于 50 mL 三角瓶中，待正己烷挥发完全后，

加入灭菌的 MSM，并接入 2 mL 的菌悬液，使降解体系中 PCB77 的浓度分别为 0、0.5、1.0、

3.0、5.0 mg · L-1，在 30 ℃、150 r · min-1 条件下培养 7 d，取样测定降解率.

2.4.5 微生物接种量对 PCB77 降解的影响

在无菌条件下，用移液枪分别移取 0.5、1.0、2.0、4.0 mL 菌悬液于 MSM 中，在 30 ℃、

150 r · min-1 条件下培养 7 d，取样测定降解率，确定最适接种量.

2.4.6 重金属对菌体降解 PCB77 的影响