对其 COD 进行测定，取出颗粒污泥并选择部分污泥样品进行扫描电镜分析和磷脂脂肪酸测

定.

2.4 分析项目和方法

磷脂脂肪酸(PLFA)测定：PLFA 提取方法根据牛川等方法进行并做适当修改，PLFA 生物

标记优势菌种分类方法根据牛川等方法进行，数据采用 Excel 和 SPSS 进行统计分析.

PLFA 具体提取方法如下：①提取与分离：取 5 mL 厌氧污泥离心去上清液，加入 15 mL

提取液(甲醇 ∶ 氯仿 ∶ 磷酸缓冲液=2 ∶ 1 ∶ 0.8，体积比)，涡旋振荡 1 min，室温下

往复式振荡 16 h，静置 10 min，收集上清液;再加 15 mL 提取液涡旋振荡 1 min，室温下往

复式振荡 2 h，静置 10 min，收集上清液;合并上清液，加入 2.5 mL 氯仿和 2.5 mL 无菌水，

振荡 1 min，取下层液体在 40 ℃电热干浴用氮气吹干，然后用 1 mL 氯仿溶出;氯仿提取样

品用硅酸柱洗脱，在 5 mL 甲醇洗脱液中加入 50 mg · L-1 内标十九烷酸 100 μL，在 40 ℃

电热干浴用氮气吹干，后用 1 mL 氯仿溶出;②皂化：加入 1 mL 试剂 1(NaOH ∶ 甲醇 ∶ 蒸

馏水=45 g ∶ 150 mL ∶ 150 mL)，拧紧盖子振荡 5~10 s 后，置沸水浴 5 min，振荡 5~10 s

后再放置于沸水浴中 25 min，取出后用冰浴冷却;③甲基化：加入 2 mL 试剂 2(6 mol · L-1

HCl ∶ 甲醇=325 mL ∶ 275 mL)，涡旋振荡，80 ℃加热保温 10 min，取出后冰浴冷却;④

萃取：加入 1.25 mL 试剂 3(正己烷 ∶ 甲基叔丁醚=200 mL ∶ 200 mL)，振荡提取 PLFA 甲

酯，吸取上层正己烷相;⑤洗涤：加 3 mL 1.2%的 NaOH 溶液，摇动 5 min，吸取上层溶液转

入气相色谱瓶.

PLFA 采用安捷伦 7890A 气相色谱测定，气相色谱各参数由 MIDI Sherlock 程序设置调

用.扫描电镜分析：污泥样品预处理方法根据方法进行.CODCr 等按照《水和废水监测分析方

法》测定.

3 结果

3.1 不同抑制物质及浓度下 COD 去除率情况

不同 NO-2-N、NO-3-N 和 NH+4-N 浓度条件下 COD 的去除率情况如图 1 所示，进水 COD

值均为(1958±4.64)mg · L-1，空白组的 COD 去除率为 93.23%.由于抑制作用，3 种抑制物

质作用下的 COD 去除率均随抑制物浓度升高呈下降趋势，A 组(亚硝氮组)和 B 组(硝氮组)的

抑制趋势较为接近，C 组(氨氮组)与前两组有明显区别.A 组中，低浓度的亚硝氮并未对 COD

去除率造成严重影响，40 mg · L-1 亚硝氮使 COD 去除率降低至 46.97%，亚硝氮浓度高达

360 mg · L-1 时 COD 去除率降至最低即 3.49%;B 组中，低浓度硝氮(15、30、60、120 mg ·

L-1)对 COD 去除率的抑制作用不明显，210 mg · L-1 硝氮使 COD 去除率下降至 40.86%，硝

氮浓度高达 300 mg · L-1 时 COD 去除率下降至 10.85%;C 组中，随着氨氮浓度的升高，COD

去除率呈坡度下降趋势，但下降趋势并不急剧，浓度最高达 3000 mg · L-1 时 COD 去除率

仅下降至 71.53%.