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设置 3 组柴油浓度培养基,分别为 80、120、140 mg · L-1.加入 0.5 g 固定化菌体,
在 30 ℃、150 r · min-1 下于恒温振荡箱中避光培养,分别在 0、12、24、36、48、60、
72、84、96 h 取样测定溶液中柴油浓度,每个处理重复 3 次. 柴油的吸附量(Q)的计算公式
如下:
式中,C0 为柴油的初始浓度(mg · L-1),Ct 为反应时间为 t 时溶液中残余的柴油浓度
(mg · L-1),V 是溶液体积(L),M 是改性竹炭颗粒的质量(g).
2.2.5 柴油及其降解产物分析
培养基中柴油含量分析步骤如下,向培养基、锥形瓶各加入 10 mL 正己烷作为萃取剂,
手动萃取 5 min,静置 10 min 移取上清液,利用 UV-Vis 在波长 226.5 nm 处测定吸光度,
外标法定量柴油浓度.
柴油降解产物分析采用气相色谱-质谱联用法,样品的提取按照 Vieira 等(2007)报道的
方法.以正己烷萃取反应前后含柴油的水溶液,振荡 5 min,再添加定量的无水硫酸钠充分
吸水,最后取适量装瓶测样,分别对反应前后溶液的去除效果进行分析.本研究采用的仪器
是 GC-MS(Agilent 6890-5975,美国):DB-5 石英毛细管柱(30 m×0. 25 mm×0. 25 μm);
载气为 He;流速为 1 mL · min-1;柱温 60 ℃,恒温 2 min,以 12 ℃ · min-1 升温至 300
℃,恒温 5 min;进样口温度 250 ℃,检测器温度 300 ℃,总运行时间 27 min(Morris et al.,
2009).
2.2.6 SEM 样品的制备与分析
取固定化菌体用无菌水洗涤 3 次,再使用 2.5%戊二醛缓冲溶液(pH=7.2)浸泡 0.5 h,用
无菌水洗去残余的戊二醛后,加入不同浓度的乙醇溶液(30%、50%、70%、80%、90%和 100%)
逐级脱水,每个浓度脱水 10 min,放入冷冻干燥器里干燥 8 h. 再将制得的样品固定在导电
胶上,进行等离子表面喷金. 采用日本 Hitachi 公司(型号为 S-570)的扫描电子显微镜,观
察样品表面的形貌与形态(Liu et al., 2012).
2.2.7 FTIR 分析
含柴油水溶液处理前后的傅里叶变换红外光谱采用美国 Thermo Corp 公司的
Nicolet5700 红外光谱仪(波数范围为 400~4000 cm-1,4 cm-1 的光谱分辨率)进行分析,采
用 KBr 法进行制样.