表

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作 用 后 人 乳 腺 癌 细 胞

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基 因

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的 表 达

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图

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转 染

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细 胞

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后

荧 光 共 聚 焦 显 微 镜 分 析 结 果

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U-V,XP

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L/VOLO

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U-V-YO

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YUV,OU

OUVXXX

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XUV/LL

Y/VXY7

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PVYPP

PVLUL

7V,XY

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谭 金 祥 !等

V "2$G&

沉 默

RS&T7

基 因 表 达 对 人 乳 腺 癌 细 胞 生 长 和 增 殖 的 影 响

7V,VO

流式细胞 仪 检 测 细 胞 周 期

!2$G&

转 染 按

&>F29;

公 司 转 染 试 剂 盒 说 明 书 进 行 $

!2$G&

终 浓

度为

7PP ;>98 Z T

$

/U 0

后取出

X

孔板$ 消化细胞$

离心$去上清液$少量

EJM

洗两次$再离心$吸尽上

清液$加入

OP\

的冰乙醇固定细胞$上流式细胞仪

检测细胞周期分布& 实验分

]

组#实验组!

RS&T7*

!2$G&

"’

阴 性 对 照 组

7

!

无 血 清

$E’I*7X/P

对 照 "

和 阴 性 对 照 组

.

!

;63=C2Q6 :9;C598*!2$G&

"$

每 组 实

验重复

]

次&

7V.VU

统计学方法

用

MEMM 77VP

统计软件包$采

用方差分析$并进行两两比较&

!

结

果

!"#

!$%&’

转染细胞条件筛选及效率的评价

!2$G&

用

D1E

标记后$转染到细胞中$在

X

孔

板选取转染细胞密度为

7^7P

L

_L^!P

L

Z

孔’

!2$G&

浓

度 为

LP_!PP ;>98 Z T

作 为 初 步 预 实 验 条 件 & 结 果

发 现 $ 在 细 胞 密 度 为

.VP ^!P

L

Z

孔 $

!2$G&

浓 度 为

!PP ;>98 Z T

时 $ 有 较 佳 的 转 染 效 率 & 实 验 重 复

]

次$荧光共聚焦显微镜观察$随机计数

!PP

个有蓝

色荧光的细胞$ 其中有双色荧光的细胞数在

YP\

以上!图

!

"&

!"!

"2$G&

抑制

()’*# +%&’

的表达

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株 细 胞 经

!2$G&

作 用

/U 0

后 $ 实 验 组 的

RS&T! >$G&

表 达 水 平 较 阴 性 对 照 组 明 显 下 调

!

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"$

较 阳 性 对 照 组 显 著 下 调 !

"[PVP!

"%

阳 性

对 照 组

RS&T! >$G&

表 达 水 平 较 阴 性 对 照 组 明

显上调!

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表

!

’

图

.

"

图

.

/

株 人 乳 腺 癌 细 胞

RS&T! $‘*EK$

电 泳 图 谱

123456 .

$‘*EK$ 686:C59?0956C935=> 9< RS&T! 2;

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