图
２ １００ ｎｇ ／ｍｌ
瘦素作用不同时间后
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细胞中
ＥＲＫ１ ／２
的活化水平
Ｆｉｇｕｒｅ ２ ＥＲＫ１ ／２ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｉｎ Ｉｓｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
ｏｆ １００ ｎｇ ／ｍｌ ｌｅｐｔｉｎ
Ｌａｎｅ １： Ｉｓｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ｂｅｆｏｒｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ； ｌａｎｅｓ ２－４： Ｉｓｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ
ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ １００ ｎｇ ／ｍｌ ｌｅｐｔｉｎ ｆｏｒ ２０， ４０， ａｎｄ ６０ ｍｉｎ．
ａ
Ｐ＜０．０１， ｖｓ．
ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ；
ｂ
Ｐ＜０．０１， ｖｓ． ２０ ｍｉｎ ｇｒｏｕｐ；
ｃ
Ｐ＜０．０１， ｖｓ． ４０ ｍｉｎ ｇｒｏｕｐ．
１．３
统计学处理
实验数据以
ｘ±ｓ
表示， 用
ＳＰＳＳ１２．０
软件处理
数据， 多组均数比较采用单因素方差分析。
Ｐ＜０．０１
为差异有统计学意义。
２
结 果
２．１
免疫荧光染色
免 疫 荧 光 染 色 结 果 显 示
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细 胞 存 在 瘦
素受体， 呈强绿色荧光（ 图
１
） 。
２．２
瘦素对
Ｉｓ ｈｉｋａｗａ
细胞增殖的影响
瘦 素 对
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细 胞 的 增 殖 有 促 进 作 用 ，
１０
ｎｇ ／ｍｌ
瘦素作用
２４ ｈ
后显示出促增殖效应， 其余各
浓 度 组 在
６
、
１２
、
２４ ｈ
时 与 对 照 组 比 较 均 明 显 促 进
细胞增殖。在
０～１００ ｎｇ ／ｍｌ
范围内瘦素浓度越高，
细胞增殖越明显， 瘦素浓度达
１００ ｎｇ ／ｍｌ
其增殖效
应最大，
１５０ ｎｇ ／ｍｌ
组与
１００ ｎｇ ／ｍｌ
组比较， 差异无
统计学意义（
Ｐ＝０．１２９
） （
表
１
） 。
２．３
Ｐ Ｄ９８０５９
对 瘦 素 刺 激
Ｉｓ ｈｉｋａｗａ
细 胞 增 殖 的
影响
加 入
ＰＤ９８０５９
阻 断
ＥＲＫ１ ／２
磷 酸 化 ， 可 明 显
抑 制 瘦 素 对
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细 胞 的 促 增 殖 作 用 。 不 同 浓
度
ＰＤ９８０５９
作 用
６
、
１２
、
２４ ｈ
后 ，
均 显 示 随
ＰＤ９８０５９
浓 度 增 高 ， 对 瘦 素 刺 激
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细 胞 增
殖的抑制作用逐渐增强， 各组之间 比 较 差 异 有 统
计学意义（
Ｐ＜０．０１
） （
表
２
） 。
２．４
瘦素对
Ｉｓ ｈｉｋａｗａ
细胞
ＥＲＫ１ ／２
活化的影响
无 瘦 素 刺 激 时 ，
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细 胞 便 有 一 定 量 的
ＥＲＫ１ ／２
活性； 经
１００ ｎｇ ／ｍｌ
瘦素处理后， 随时间延
长
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细胞
ＥＲＫ１ ／２
活化水平逐渐增高， 且持
续至少达
６０ ｍｉｎ
（
图
２
） 。
表
２ ＰＤ９８０５９
对瘦素刺激
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细胞增殖的抑制作用
Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＰＤ９８０５９ ｏｎ ｔｈｅ ｐｒ ｏｌｉｆｅｒ ａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｉｓｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ
Ａｌｌ ｖａｌｕｅｓ ａｒｅ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ａｓ ｍｅａｎ±ＳＤ ｏｆ ３ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．
ａ
Ｐ＜０．０１，
ｂ
Ｐ＜
０．００１， ｖｓ． ｌｅｐｔｉｎ ｇｒｏｕｐ．
Ｇｒｏｕｐ
Ｌｅｐｔｉｎ （ １００ ｎｇ／ｍｌ）
Ｌｅｐｔｉｎ （ １００ ｎｇ／ｍｌ） ｐｌｕｓ
ＰＤ９８０５９ （ ２０ μｍｏｌ ／Ｌ）
Ｌｅｐｔｉｎ （ １００ ｎｇ／ｍｌ） ｐｌｕｓ
ＰＤ９８０５９ （ ５０ μｍｏｌ ／Ｌ）
Ｌｅｐｔｉｎ （ １００ ｎｇ／ｍｌ） ｐｌｕｓ
ＰＤ９８０５９ （ １００ μｍｏｌ ／Ｌ）
６ ｈ
７０．０８±３．８５
４０．１７±３．５６
ａ
２２．１６±１．７９
ｂ
７．２０±１．３１
ｂ
１２ ｈ
７０．６３±４．１２
４４．６６±３．８７
ａ
２２．０９±２．１６
ｂ
７．２８±１．１７
ｂ
２４ ｈ
３９．７７±２．１３
２０．８４±１．９４
ａ
１１．８５±１．２０
ｂ
６．８８±０．８６
ｂ
Ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ（ ％）
龚
成， 等
．
细胞外信号调节激酶
１ ／２
在瘦素促进子宫内膜癌
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细胞增殖中的作用
表
１
不同浓度的瘦素对
Ｉｓｈｉｋａｗａ
细胞增殖的刺激作用
Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｌｅｐｔｉｎ ａｔ ｄｉｆｆｅｒ ｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒ ａｔｉｏｎｓ ｏｎ ｔｈｅ
ｐｒ ｏｌｉｆｅｒ ａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｓｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ
Ａｌｌ ｖａｌｕｅｓ ａｒｅ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ａｓ ｍｅａｎ±ＳＤ ｏｆ １０ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．
ａ
Ｐ＜０．０１， ｖｓ．
０ ｎｇ ／ｍｌ ｇｒｏｕｐ；
ｂ
Ｐ＜０．０１， ｖｓ． １０ ｎｇ ／ｍｌ ｇｒｏｕｐ；
ｃ
Ｐ＜０．０１， ｖｓ． ５０ ｎｇ ／ｍｌ
ｇｒｏｕｐ．
Ｌｅｐｔｉｎ（ ｎｇ ／ｍｌ）
０
１０
５０
１００
１５０
６ ｈ
０．３５±０．０２
０．３７±０．０１
０．５４±０．０３
ａ
，
ｂ
０．６０±０．０２
ａ
，
ｂ
，
ｃ
０．６２±０．０２
ａ
，
ｂ
，
ｃ
１２ ｈ
０．４１±０．０１
０．４２±０．０１
０．６４±０．０２
ａ
，
ｂ
０．７０±０．０２
ａ
，
ｂ
，
ｃ
０．７２±０．０２
ａ
，
ｂ
，
ｃ
２４ ｈ
０．５２±０．０１
０．６５±０．０２
ａ
０．６８±０．０２
ａ
，
ｂ
０．７３±０．０２
ａ
，
ｂ
，
ｃ
０．７４±０．０２
ａ
，
ｂ
，
ｃ
Ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ（ ％）
图
１ Ｉｓｈｉｋａｗａ
细胞中瘦素受体的免疫荧光染色（
ＳＰ ×２００
）
Ｆｉｇｕｒｅ １ Ｆｌｕｏｒｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ ｏｆ ｌｅｐｔｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ＯＢ－Ｒｂ ｉｎ
Ｉｓｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ
（
ＳＰ ×２００
）
Ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ Ｉｓｈｉｋａｗａ ｃｅｌｌｓ ａｔ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ
５１０ ｎｍ．
１２１３