数量(个 / 平板)
41~50
22~32
32~41
35~45
表 3
酵母用培养基对糟醅中酵母菌的分离培养效果
培养基类型
YPD 培养基
麦芽汁培养基
麦氏琼脂培养基
酯化酵母培养基
类别(种 / 平板)
4~5
2~3
3~4
3~4
单离效果
好
一般
较好
一般
数量(个 / 平板)
40~50
20~30
30~40
33~43
表 4
酵母用培养基对窖泥中酵母菌的分离培养效果
培养基类型
YPD 培养基
麦芽汁培养基
麦氏琼脂培养基
酯化酵母培养基
类别(种 / 平板)
4~5
3~4
3~4
3~4
单离效果
好
一般
较好
一般
数量(个 / 平板)
20~25
15~20
15~20
18~23
表 5
霉菌用培养基对糟醅中霉菌的分离培养效果
培养基类型
淀粉培养基
察氏培养基
PDA 培养基
豆芽汁培养基
类别(种 / 平板)
4~5
3~4
3~4
3~4
单离效果
较好
一般
一般
较好
数量(个 / 平板)
19~25
13~18
15~20
17~22
表 6
霉菌用培养基对窖泥中霉菌的分离培养效果
培养基类型
淀粉培养基
察氏培养基
PDA 培养基
豆芽汁培养基
类别(种 / 平板)
4~5
3~4
3~4
4~5
单离效果
较好
一般
一般
较好
小,因此采用淀粉培养基作为从浓香型白酒糟醅和窖泥中分
离培养霉菌的培养基是可行的。
2.4 放线菌用培养基的微生物分离培养
放线菌在高氏培养基、面粉琼脂培养基和马铃薯培养基
的分离培养情况见表 7 和表 8。所有的平板采用同一菌悬液
稀释度(10
- 2
)及涂布量(0.2mL)进行培养和计数,
实验中采用的
是枝江酒业股份有限公司出窖的糟醅、窖泥。从实验结果可以
看出,对糟醅和窖泥中的放线菌的培养及分离效果,高氏培养
基在分离的菌落数量和菌落类别上都高于面粉琼脂培养基和
马铃薯培养基,因此采用高氏培养基作为浓香型白酒糟醅和
窖泥中分离培养放线菌的培养基是可行的。
3
结论
根据实验结果,我们认为对浓香型白酒糟醅和窖泥中细
菌、酵母菌、霉菌和放线菌的分离培养,分别以牛肉膏蛋白胨
培养基、YPD 培养基、淀粉培养基和高氏培养基为宜,各培养
基的配方及配制情况如下:
牛肉膏蛋白胨培养基(1000mL):牛肉膏 3g,蛋白胨 10g,
NaCl5g,琼脂 20g,蒸馏水 1000mL,
pH7.0~7.2,
121℃灭菌
20min;
YPD 培养基(1000mL):葡萄糖 20g,蛋白胨 20g,酵 母 膏
10g,
琼脂 20g,蒸馏水 1000mL,pH 自然,113℃灭菌 30min;淀
粉培养基(1000mL):蛋白胨 10g,牛肉膏 5g,NaCl5g,可溶性淀
粉 2g,琼脂 20g,蒸馏水 1000mL,pH 自然,121℃灭菌 20min;
高氏培养基 (1000mL):可溶性淀粉 20g,KNO
3
1g,
NaCl
0.5g,
K
2
HPO
4
0.5g,
MgSO
4
0.5g,
FeSO
4
0.01g,
琼脂 20g,蒸馏水
1000mL,
pH7.2~7.4,
121℃灭菌 20min(配制时,先用少量冷水,
将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入
其他成分,溶化后,补足水分至 1000mL)。
培养基能较好地满足多种类型微生物的生长和繁殖的需
要,
才能最大限度和比较客观地反映微生物的种类、数量及相
对比例,探讨其变化规律。本文中关于微生物菌落类别的统
计,
是根据形态外观及色泽等的观察结果,菌种鉴定用做生理
生化实验的方法将未知菌鉴定到属。我们在微生物数量和类
别上的统计结果与其它研究报告的不同之处,可能与浓香型
白酒产品的风格差异、特定的窖池生产环境、培养基的选取及
取样操作等多种因素有关,关于这方面的差异,将在以后的研
究中作进一步的探讨。
[参考文献]
[1]郭来虎.中国第一窖[M].北京:
中国工人出版社,
1999
[2]施安辉.浓香型白酒发酵过程窖中微生物区系的分析[J].酿酒,
l986,
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[3]罗志腾.大曲发酵酒醅微生物区系的初步研究[J].微生物学通报,
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59- 60
[4]熊昌绪.浓香型白酒酒醅发酵过程中微生物消长物质变化的研究[J].
酿酒科技,
1994,
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25
[5]乔宗伟,
张文学,张丽莺,等.浓香型白酒糟醅微生物分离培养基的
选择研究[J].酿酒科技,2004,(6):30- 32.
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高等教育出版社,
1996
[7]陈田寿.微生物培养基的制造与应用[M].北京:中国农业出版社,
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2001,
(1):
66- 71
[9]杜连祥,
路福平.微生物学实验技术[M].高等学校专业教材,中国轻
工业出版社,
2005
数量(个 / 平板)
10~20
5~15
7~17
表 7
放线菌用培养基对糟醅中放线菌的分离培养
培养基类型
高氏培养基
面粉琼脂培养基
马铃薯培养基
类别(种 / 平板)
2~3
1~2
1~2
单离效果
好
一般
一般
数量(个 / 平板)
10~20
5~15
8~20
表 8
放线菌用培养基对窖泥中放线菌的分离培养效
培养基类型
高氏培养基
面粉琼脂培养基
马铃薯培养基
类别(种 / 平板)
2~3
1~2
1~2
单离效果
好
一般
一般
第一期
2009
酿
酒
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