过肠粘膜，因而难以发挥全身性药效作用

;

　

　

(5)大分子异性蛋白，

不宜大剂量、长时间使用，否则会不可避免地出现某些过敏性变态反应，呈

现明显的不良反应性变化

;

　　

(6)对靶细胞或靶部位的亲和力低，药用趋向性不明显。

因此，对疾病的疗效缺乏特异性作用

;

　　

(7)酶的稳定性不高

，对理化因素较为敏感，过高温度、过大剂量辐射、过长时间超声波、过强酸碱度、

过多化学物质及变性剂、还原剂等均易导致

SOD 分子结构改变，酶活性丧失，形成不可逆性变化;

　　

(8)药物作用单一性大、

常规剂量单独使用疗效欠佳。

　　针对

SOD 应用过程中客观存在的局限性，国内外学者进行了大量卓有成效的研究工作，并已逐步探

索或寻找出解决上述局限的一些有效方法和对策。

　　

4. SOD 的制备

　　

SOD 广泛存在于动、植物和微生物体内，但目前我国主要是从动物血液中提取。受到血源和得率的限

制，影响了

SOD 的生产成本和推广应用。

　　由于利用微生物

(深红酵母)生产 SOD 具有易培养、易大规模工业化生产、不受季节与自然条件限制等

优越性，因此，微生物

SOD 的生成具有更广阔的发展前景。其工艺流程如下：

→

→

 → 

　　菌体培养 破壁 菌体破片

Rnase 酶解、离心 30

 → 

→ 

分钟

清液

上

DE32

 → 

柱

0.2mol/L NaCl 洗

 → 

→ 

脱

洗脱液

加

45%(NH4)2SO4

 → 

 → 

、离心

上清液

上

DE32

 → 

 → 

→ 

→ 

柱

洗脱

洗脱液

浓缩

冷冻干燥

→ SOD 成品。

　　破菌的方法可采用超声波处理法、酶裂解法、细胞自溶法、氯仿

-乙醇法和甲苯法等。根据有关的研究表

明，用甲苯法破壁对提取酵母

SOD 具有一定的优越性。另外，为了提高 SOD 纯度，在洗脱时可采用梯度

洗脱法。

　

　

5.SOD 的纯度检查

　　

SOD 产品一般为浅绿色冻干粉，其纯度的检查主要根据以下三个指标。

　

　

(1)均一性

　　通常用聚丙烯酰胺凝胶电泳检查其均一性。也可用琼脂糖凝胶电泳，其操作简单，试剂单一且色带的

间隔比前者大，更易观察与分析。还可进行超离心分析来检查其均一性。

　　

(2)酶的比活

　　要求达到一定的标准。如：化妆品用

SOD

≥

比活

3000u/mg 蛋白质;口服用 SOD

≥

比活

3500u/mg

蛋白质

;标准(活性测定用)及药用 SOD

≥

比活

5000u/mg 蛋白质;试剂用 SOD(电泳纯)

≥

比活

8000u/mg

蛋白质。