植物

SOD 样品(串叶松香草提取)1g、pH 7.5 质量浓度 0.05mol/ L 的磷酸钠缓冲液、

丙酮、

0.4mmol/L 肾上腺素溶液、50mmol/L pH 为 10.2 的 Na2CO3-NaHCO3 缓冲液内

含

1*10-4M 乙二胺四乙酸二钠、双蒸水、100mmol/L 盐酸液，内含 1*10-4M 乙二胺四乙

酸二钠

　

　

2、实验器具

　　试管

30ml、WFZ UV-2100 型紫外可见分光光度计、501A 型超级数显恒温水浴、PHS-

3C 精密 pH 计

　

　三、

 实验步骤

　　

1、配置溶液：配置 pH 7. 5 质量浓度 0. 05mol/L 的磷酸钠缓冲液、50mmol/L pH 为

10.2 的 Na2CO3-NaHCO3 缓冲液及 0.4mmol/L 肾上腺素溶液(62:38);

　　

2、植物 SOD 样液的制备。将植物 SOD 样品,加入 pH7.5 质量浓度 0.05mol/L 的磷酸

钠缓冲液

,于 4℃条件下 3500 转/min 离心 15min ,取酶液,加入- 20℃预冷丙酮,取沉淀物

溶于少量重蒸水中

,pH7.5、质量浓度 25mmol/L 的磷酸钠透析即得酶的粗提液。

　 　

3 、 将配 置 好 的 50mmol/L pH 为 10.2 的 Na2CO3-NaHCO3 缓冲 液放 到 30℃

±0.5℃水浴中保温 20 min;

4、按照下表做实验组合对照组

肾上腺素自氧化法加样表：　　

加样管号

对照组

实验组

50mmol/L pH 为 10.2 的 Na2CO3-NaHCO3 缓冲液

内含 1*10-4M 乙二胺四乙酸二钠

8.3ml

8.3ml

0.4mmol/L 肾上腺素溶液

内含

1*10-4M 乙二胺四乙酸二钠

0.3ml

/

双蒸水

0.4ml

0.4ml

100mmol/L 盐酸液

/

0.3ml

总体积

9ml

9ml

　　

5 将配置好的溶液分别放到 325nm 的分光光度计下测其吸光值，每隔 1min 记一次