测定Ｌ－苏氨酸的产量。

 

本文为全文原貌

 未安装 PDF 浏览器用户请先下载安装 原版全文 

　　２结果与分析

 

　　２．１种子培养基的优化

 

　　从表２中极差Ｒ的大小可知，各因素对产酸的影响顺序依次是硫酸铵、玉米浆、酵母膏、
葡萄糖。硫酸铵是无机氮源，其能被菌体快速利用，以满足菌体生长繁殖及产物合成的需要，
对种子培养基及产物形成的影响最大；玉米浆是制造玉米淀粉的副产物，含有丰富的蛋白
质以及其他一些生长因子，在种子培养基中既能够补充氮源还能提供微生物生长所需的多
种营养物质，所以对产物合成影响也较大；酵母膏富含蛋白质、核苷酸、维生素及微量元素
等微生物生长所必需的生长元素，对产物的形成有一定的影响；葡萄糖对产物影响最小，
在种子培养基中不宜多加，因为高浓度的糖类不仅不能维持菌体生长，反而会起到抑菌或
杀菌的作用。

 

　　４个因素的最优水平组合为Ａ１Ｂ３Ｃ１Ｄ２，即葡萄糖３０

 ｇ／Ｌ，玉米浆４０ ｇ

／Ｌ，硫酸铵３

 ｇ／Ｌ，酵母膏５ ｇ／Ｌ。由于正交实验所确定的最佳条件并未包含在正

交表的９个试验中，为了进一步确定试验结果的可重复性，采用最佳条件进行重复实验。由
表３可知，按照最佳种子培养基的配方所得的平均产酸量为５．７８

 ｇ／Ｌ，试验结果较

为理想。

 

　　２．２种子培养条件的优化

 

　　２．２．１种子培养基装液量对发酵产酸的影响Ｌ－苏氨酸发酵属于好氧发酵，溶解
氧对苏氨酸发酵的影响较大，发酵过程应控制通风，以满足菌体生长和产酸的需要。在一定
温度下溶氧是装液比（培养基装液量／三角瓶体积）和摇瓶转速的函数［７］，如果摇瓶
转速固定则装液比就会直接影响到培养基的溶氧情况。本试验采用固定摇床转速，考察同一
规格三角瓶在不同装液量情况下菌体的发酵产酸水平。根据试验结果（图１），不同的种子
培养基装液量对发酵产酸量的影响比较明显，在２５０

 ｍＬ三角瓶中装２５ ｍＬ的种子培

养基，发酵产酸量最大。

 

　　２．２．２种子接种量对发酵产酸的影响由图２可知，接种量过大或者过小均不利于
产酸。大量地接入菌种，缩短了发酵周期，但是会造成培养基中溶氧过少，影响发酵产物形
成；接种量过少，培养基中菌体浓度小，也不利于产物形成，当种子液的接种量为１０％
时，发酵产酸量最大。

 

　　２．２．３种子液初始ｐＨ值对发酵产酸的影响分析图３可知，种子培养基过酸或过
碱，均不利于产物的形成，当种子液的初始ｐＨ值为７．０时，发酵产酸量最大。分析原因
可能是因为ｐＨ值的变化会引起各种酶活力的改变，从而对菌体生长和代谢能力产生影响
［８］。

 

　　２．２．４种龄对发酵产酸的影响一般地，接种的种龄以对数生长期的后期，即培养
液中菌浓度接近高峰时较为适宜。种龄短的种子接种后往往会导致前期生长缓慢，整个发酵
周期延长，产物开始形成时间推迟。过老的种子虽然菌量较多，但接种后会导致生产能力下
降，菌体过早衰退［６］。从种子生长曲线（图４）可以看出，菌体从４

 ｈ开始进入对数

期，１８

 ｈ以后进入稳定期，因此，种子培养时间不宜超过１８ ｈ。 

　　从图５可以看出，随着种子培养时间的延长，发酵产酸量先逐渐提高，到１６

 ｈ达到

最高产酸量，１６

 ｈ以后发酵产酸量逐渐减低。结合种子生长曲线，在１６ ｈ刚好处于种

子生长的中后期，这时的菌体数量最多，种子生长最为旺盛，接种这时期的种子发酵产酸
量最多。