2.5 液体发酵培养基营养成分的确定 

　　通过试验，确定乳杆菌

L5 株液体发酵培养基最佳碳源是红糖，最佳氮源是胰蛋白胨，

最佳磷源是

β-磷酸甘油二钠，最佳增菌因子是酵母膏。 

　　

2.6 发酵培养条件的优化 

　　优化发酵培养条件的正交试验设计方案及结果见表

3。由表 3 可知，3 个因素对乳酸杆

菌

L5 株增殖的影响顺序为：温度＞时间＞初始 pH 值。优化的最佳发酵条件为：培养温度

为

38 

℃，培养时间为 26 h，初始 pH 值为 5.0。 

　　

2.7 发酵培养基营养成分含量的优化 

　　发酵培养基营养成分含量的优化设计方案及结果见表

4。由表 4 可知，各营养因素对乳

酸杆菌

L5 菌株液体发酵培（上接第 333 页） 

　　养效果的影响顺序是：红糖＞胰蛋白胨＞酵母膏＞

β-磷酸甘油二钠。这几种营养因素的

最佳组合应是

2%红糖、1.5%胰蛋白胨、0.4%酵母膏和 0.5% β-磷酸甘油二钠。 

　　

3 结论与讨论 

　　本研究直接从健康的仔猪肠道中进行乳酸杆菌的分离，因为益生菌的菌株具有较强的
针对性和特异性，在其被制作成活菌制剂后也有一定的专一性

[6]。由于乳酸杆菌对环境的

抗性较差，不产芽孢，不易通过胆汁和胃酸环境，因此模拟了宿主体内低

pH 值、高胆盐浓

度的环境，进行乳酸杆菌的筛选，从而筛选出了具有较强抗逆性的菌株

L5。活菌含量决定

了微生态制剂是否有效以及作用效力的大小。系统地研究了获得最大活菌数的条件，对乳酸
杆菌

L5 株的培养基和培养条件进行了优化，结果表明，其最佳液体发酵培养基组成为 2%

红糖、

0.4%酵母膏、1.5%胰蛋白胨和 0.5% β-磷酸甘油二钠、0.2%柠檬酸铵、0.5%乙酸钠、0.1% 

L-Cys 盐酸盐、0.1%吐温-80、0.02% MnSO4、0.05% MgSO4，在初始 pH 值 5.0、38 

℃下培养

26 h，菌落总数可达 8.25×108 cfu/mL。 
　　

4 参考文献 

　 　

[1]  何 明 清 ， 倪 学 勤 . 我 国 动 物 微 生 态 制 剂 研 究 、 开 发 和 应 用 动 态 [J]. 饲 料 广 角 ，

2002（21）：1-7. 
　　

[2] JULIA B E，JOHN W W，HUGO D，et al.Bioproduction of Conjugated Linoleic Acid 

by  ProbioticBacteria  Occurs  In  Vitro  and  In  Vivo  in  Mice[J].A-merican  Society  for  Nutrition  J 
Nutr，1996（136）：1483-1487. 
　　

[3] 陈天寿.微生物培养基的制造与应用[M].北京：中国农业出版社，1995：33-34. 

　　

[4] 赵斌，何绍江.微生物学实验[M].北京：科学出版社，2002：143-159. 

　　

[5] R E 布坝南，N E 吉本斯.伯杰细菌鉴定手册[M].中国科学院微生物研究所《伯杰氏细

菌鉴定手册》翻译组，译

.北京：科学出版社，1984：793-820. 

　　

[6] 孙宪文.猪源乳酸杆菌对仔猪肠道微生物的影响[J].农业与技术，2008，28（2）：

71-73.