加样：光面用铅笔标注，无光泽面距一端

1.5cm 处用点样器蘸取新鲜血清点样（不能看见

有液滴形成），待血清进入膜内，移开点样器。
电泳：放置于电泳槽架时，无光泽面向下，点样端置于负极，膜与电极紧密接触，不能留
有气泡，平衡

5 分钟，通电 1h。

染色：通电完毕，镊子取出，浸于氨基黑的染色液中

5 分钟，立即放入盛有漂洗液的培养

皿中，反复漂洗数次，直至背景漂净，滤纸吸干，不要太干。
定量：
取

6 支试管，编号，分别用吸管吸取 0.4N NaOH 4ml；

剪下膜上各蛋白质带及另一空白部位剪一平均大小的薄膜条（空白带的宽度以最窄的条带
为准）。将各条分别浸于上述试管内（注意管与蛋白带的顺序），用力摇动，使蓝色洗出，
约半小时；
用 分 光 光 度 计 进 行 比 色 ， 波 长

650nm ， 以 空 白 薄 膜 条 洗 出 液 为 空 白 对 照 ， 读 取

A、α1、α2、β、γ 球蛋白各管的光密度。
结果计算：
      光密度总和 T ＝ A+α1+α2+β+γ       
      白蛋白％＝A/T×100%
     α1 球蛋白％＝ α1/T ×100%
     α2 球蛋白％＝ α2/T ×100%
     β 球蛋白％＝ β/T ×100%
     γ 球蛋白％＝ γ/T ×100%
【附注】
电泳缓冲液要使两侧槽的液面保持水平，以免虹吸现象影响泳动速度。
每次电泳时应更换电泳槽的正负极，以保持两侧缓冲液离子、

pH 一致。

使用一段时间后电泳缓冲液应废弃换新。
关闭电泳仪电源后才能从电泳槽上取醋纤膜，以免电击。
  表          动物血清蛋白质参考值     （g/L）
血清蛋白浓度增髙（髙蛋白血症）
TP

增加：脱水引起，非绝对量升髙。红细胞压积容量（PCV)增髙，白蛋白蛋白比值

（

A/G）正常。

白蛋白增髙：单纯白蛋白升髙很少。
球蛋白增加：
α-球蛋白（肝球蛋白、α2-巨球蛋白、α1-抗胰蛋白酶等）：组织损伤或炎症。
β-球蛋白（转铁蛋白、β-脂蛋白、补体-3 及免疫球蛋白）：活动性肝脏疾病及圆线虫病。
γ-球蛋白：慢性炎性、免疫性疾病，淋巴瘤、骨髓瘤、多克隆和肝硬化等，免疫接种。
血清蛋白浓度降低（低蛋白血症）
血浆水份增加，如静注过多低渗溶液。
白蛋白降低：白蛋白

/蛋白比值变小。

营养不良和消耗增加，饲料蛋白质长期不足或慢性肠道疾病所引起吸收不良，或因长期患
消耗性疾病。
合成障碍：慢性肝脏疾病、肝脏功能严重损害。
蛋白质丢失：大出血，烧伤，肾病综合征。
妊娠期对蛋白质需要增加。
球蛋白降低：喂初乳不足或未喂初乳；肾上腺皮质激素和其他免疫抑制剂；免疫缺陷性疾
病。