图

2 正常 mtrR 序列(2)箭头处为 105 号氨基酸 CAC

图

3 箭头处为 45 号氨基酸突变点 GGC→GAC

图

4 箭头处为 105 号氨基酸突变点 CAC→UAC

结果

46 株 淋 球 菌 测 得 MIC,TritonX?100 对 各 菌 株 的 MIC 为 :25 株 菌 MIC≤3200μg/mL ， 21 株 菌
MIC≥6400μg/mL。46 株淋球菌均进行了 mtrR 基因的序列检测，标准株的 mtrR 基因序列见图 1，2。
药 敏 测 得 其 中 有

37 株 淋 球 菌 对 青 霉 素 耐 药 (MIC≥1μg/mL), 该 37 株 菌 中 有 21 株 同 时 耐 四 环 素

(MIC≥1μg/mL)、红霉素(MIC≥1μg/mL)及 TritonX?100(MIC≥6400μg/mL)，37 株中有 5 株淋球菌仅
耐 红 霉 素 。 有

1 株淋球菌在耐青霉素、 红霉素、 四环素、 TritonX?100 的同时尚对壮观霉素耐药

(MIC≥64μg/mL)，所有菌株均对头孢三嗪敏感。

全 部

37 株耐药淋球菌均 发现有 mtrR 基因的突变，第 45 号氨基酸由 甘氨酸突变成了天门冬氨酸

(GGC→GAC)，见图 3，有壮观霉素耐药性的那株菌除了有第 45 号氨基酸的突变外,还有第 105 号氨基酸
的突变

,由组氨酸突变成了酪氨酸(CAC?UAC),见图 4。两组突变均为单碱基突变，整个 mtrR 基因的其它

位点稳定。

9 株敏感菌无 mtrR 基因的突变。

讨论

淋球菌产生多重耐药性的基本原因之一，就是细菌能把药物有效地排出细胞外，而该外排过程是由细胞膜
上脂蛋白在

ATP 酶催化下通过外泵作用完成的。该脂蛋白的过多表达与临床细菌耐药直接有关，其编码基

因即

mtr 基因系统。淋球菌能够对抗粪便中的脂类及胆盐的毒性而生存于特定的粘膜表面，就是因为其基

因 中 有

mtr 系 统 (multipletransterableresistancesystem) 的 存 在 。 mtr 基 因 系 统 由 mtrR 基 因 和

mtrCDE 基因组成,mtrR 基因控制 mtrCDE 的表达。mtrR 编码 1 个含 210 个氨基酸的蛋白，该蛋白作为
转录阻遏物结合于

mtrRCDE 基因上而影响它的转录。mtrCDE 基因位于 mtrR 基因的下游，其编码的蛋

白质存在于淋球菌的细胞膜上，该蛋白复合物能在

ATP 酶作用下通过外泵机制把药物泵出细胞外，其合成

量的增减直接决定了淋球菌的耐药程度。由于

mtrR 基因编码转录阻遏蛋白,如果 mtrR 基因有突变，将会

导致阻遏蛋白阻遏作用减少或消失，使

mtrR 基因下游的 mtrCDE 基因转录开放,细胞膜脂蛋白中表达受

其控制的

mtrCDE 蛋白复合物表达增多。过多的 mtrCDE 蛋白使外泵系统功能增强,细胞膜通透性降低,并

增加对多种抗菌因子的抵抗力。

本实验检测了淋球菌的

mtrR 基因的 DNA 序列，将其结果与该菌对脂溶性因子包括脂溶性抗生素、去污

剂类脂肪酸

(TritonX－100)的敏感性进行对照，寻找国内淋球菌产生染色体耐药的主要原因。本实验的

46 株菌株都较有针对性，它们中的 70％来源于临床复发患者，曾用过青霉素、淋必治、强力霉素等药。
实验发现，在

β－内酰胺酶阴性的淋球菌菌株中，具有青霉素耐药性的菌株毫无例外都有 mtrR 基因的变

异。在

mtrR 基因编码的 210 个氨基酸中,第 45 号氨基酸由甘氨酸突变成了天门冬氨酸(GGC→GAC)是造

成淋球菌对青霉素、红霉素、四环素及去污剂类脂肪酸

TritonX?100 抗性增高的主要原因。9 株药物敏感

                                                       

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