【摘要】
目的探讨鉴定脉络膜新生血管(choroidal neovascularization CNV)模型的一种客观
可 靠 的 方 法 。 方 法 在 间 接 检 眼 镜 下 用 氩 激 光 光 凝 有 色 家 兔 视 网 膜 , 分 别 于 光 凝 后
7、14、21、28 天时行视网膜光学相干断层扫描(optical coherence tomography, OCT)和荧光
血管造影(
FFA),并做组织学检查。结果光凝后 7、14 天时,OCT 检查见光凝斑视网膜变
薄,脉络膜反射被遮蔽,
FFA 未见荧光渗漏,光镜检查见视网膜神经层变薄。光凝 21 天后,
OCT 检查见光凝斑视网膜色素上皮(RPE)层和脉络膜毛细血管层反射光带增厚,光凝后 21
和
28 天时,FFA 检查分别有 55%和 35%的光斑有点状荧光渗漏,光镜检查有脉络膜新生血
管形成。
结论 OCT 检查与 FFA 及组织学检查结果相符合,OCT 及 FFA 检查可作为鉴定是
否有
CNV 形成的客观可靠的方法。
【关键词】
新生血管 光学相干断层扫描 荧光血管造影 氩激光
脉络膜新生血管(
CNV)可见于老年性黄斑变性、病理性近视、中心性渗出性脉络膜视
网膜炎、外伤、肿瘤、血管样条纹症等多种疾病,且多位于黄斑区,甚至在中心凹下,严重影
响视力,目前尚无特效治疗,且易复发
,因此探索 CNV 的发病机制与治疗手段正成为国内
外研究的热点。而制作出合适的
CNV 动物模型是 CNV 的发病机制与治疗研究的主要途径,
本研究拟寻找客观可靠的方法对激光诱导的兔眼
CNV 是否形成进行鉴定。
1 材料和方法
1.1 动物:色素兔 16 只(32 只眼),体重 2.0~2.5kg,雌雄不限,由福建医科大学实验动物中心
提供
,实验前双眼前后段检查均正常。每只兔随机取一侧眼为实验眼,另侧眼为对照眼。
1.2 试剂:10%荧光素钠注射液(广西梧州制药股份有限公司产品)。仪器:氩激光机(德国
Zeiss 公司产品);间接检眼镜; 荧光素眼底血管造影摄像机(日本 Canon 公司产品);第三
代光学相干断层扫描仪
(OCT3 德国 Zeiss 公司产品)。
1.3 激光造模 色素兔经耳缘静脉注射 2%戊巴比妥钠 30mg・kg-1 麻醉,双眼滴用复方托
吡卡胺滴眼液
2-3 次,充分散瞳后拍摄实验前眼底彩照, 经激光间接检眼镜(LIO)用氩激光
(波长为 514nm)在兔视盘下视网膜区域内光凝 20 个点,激光功率为 0.8W,光斑直径为 100μm
和曝光时间
100ms,每两个激光点之间距离约为 1~1.5 个光斑直径。
1.4 检查方法
1.4.1 OCT 光凝后兔子分笼喂养,于光凝后 1、2、3、4 周分别从中随机取 4 只兔麻醉后散
瞳
,实验眼行视网膜光凝区水平和垂直线扫 6 条, 扫描线长 5.0mm,对照眼相应视网膜区对比
检查。
1.4.2 眼底彩照、FFA 眼底照相后兔耳缘静脉内注射 10%荧光素钠(0.1ml・kg-1)行 FFA
检查。
1.4.3 光镜 兔检查完后,耳缘静脉内注入过量麻醉药致死,立即摘取眼球,去除眼前节及
玻璃体
,将后极部眼球壁光凝区剪成 5mm×5mm 大小,经固定、脱水、透明、包埋后连续切片
(4μm 厚),HE 染色后于光镜下观察。
2 结果
2.1 眼底镜观察及 FFA 在进行光凝时,视网膜随着激光能量密度的增加由灰白色到乳
白色斑,边界不清,光斑中央有气泡形成是
bruch 膜破裂的标志。光凝后 2 天,视网膜水肿,
隆起。光凝后
1 周,视网膜水肿减轻,光斑边界不规则,光斑中央少量色素沉着。光凝后 2
周,视网膜水肿不明显,光斑中央色素增加。光凝
4 周,视网膜无水肿,光斑表面渐形成土