陈文敏，等．CIK 细胞治疗妇科肿瘤的临床研究

第 12 期

比例加入 96 孔培养板中，另设单独靶细胞组和
单独效应细胞组作为对照，在 37 ℃，5% CO

培

养 48 h 后，弃未贴壁的死细胞，用 1640 培养液
洗 3 次，加入 5 mg/mL MTT 50 μL/ 孔，37 ℃ 5％

培养箱培养 4 h，然后每孔加入 100 μL DMSO

温育至结晶溶解，在 570nm 波长处检测吸光值
A，计算细胞毒活性公式

[3，

：

细胞毒活性＝

（对照 A－本底 A 值）－（效应孔 A 值－本底 A 值）

（对照 A－本底 A 值）

1.3.4

免疫治疗计划

每位患者在接受其他标准

治疗后 4 周，在完善治疗前基线评估后，静脉回
输 CIK 细胞，每次近似于 1×10

个，总体 100

mL，每 3～5 次为一疗程．根据患者病情，每个
患者进行 3～4 个疗程治疗．在完成上述规定治疗

后，所有患者在接受治疗后即开始进入随访期．

1.3.5

疗效评价与观察指标

主要终点评价指标

为无肿瘤进展时间，次要终点评价指标为近期疗
效和不良事件．无肿瘤进展时间定义为: 接受免疫
治疗起到肿瘤进展时间．临床疗效评价: 若有可评
价病灶患者的临床疗效评定，按照卫生部颁布的
实体瘤客观疗效评定标准进行．完全缓解（CR）：
瘤体完全消失持续至少 4 周以上；部分缓解

（PR）：肿瘤最大直径减少 50%以上，持续至少 4

周；病情稳定（SD）：肿瘤增大或缩小均不超过
25%，无新病灶；病情进展（PD）：肿瘤增长大
于 25% 或出现新的病灶．完全缓解 + 部分缓解为
近期有效率，完全缓解 + 部分缓解 + 病情稳定为
疾病控制率．若无可评价病灶的患者影像学检查
发现疾病复发或转移则为 PD．接受治疗后第 4
周、第 8 周评价近期临床疗效，复查胸部 CT、
评估临床症状，血常规、血生化常规等；如怀疑
有肿瘤转移，加做相关检查．

免疫学评价：接受治疗后 2 周末，评价 12

例患者治疗前后外周血中 CD3

、 CD4

、 CD8

、

CD56

的变化．

不良事件：依据美国国立癌症研究所制定的

通用药物毒性反应标准，将各种不良事件分为

0～Ⅳ度， Ⅰ度 + Ⅱ度 + Ⅲ度 + Ⅳ度为毒性反应
发生率．

随访：所有患者在疗效评价之后每 3 个月随

访 1 次，行相关检查．如怀疑有肿瘤转移，加做
相关检查．病情进展的患者接受其他治疗方案，
仍然接受随访．截止时间为 2010 年 3 月 31 日．
1.4

统计学分析

数据采用 SPSS 软件包处理，均数±标准差

（x±s）表示，采用 t 检验，P＜0.05 为差异有统

计学意义．

结果

2.1

细胞增殖结果

在 CIK 细胞分离培养 3～6 d 细胞增殖较慢，

但是当细胞在培养 9 d 以后细胞增殖明显，是一
个快速增殖的过程，在 12 d 以后达到了

（442.66±85.27）％．

2.2

细胞表型

CIK 细胞在培养 12 d 以后，CD3

CD56

达到

了 33％以上，在 15 ～18 d 之后达到了 50％左
右．说明培养的 CIK 细胞能得到纯度很高的细胞.
2.3

细胞毒活性

CIK 细胞培养至 12 d，效靶比为 4:1、8:1 和

16:1 时，细胞毒活性分别为（40.76±13.47）％、

（61.59±13.59）％和（82.33±9.35）％，其中效靶

比为 16:1 时细胞毒活性最大．
2.4

临床疗效评价

22 例患者随访时间为 3～32 个月，患者普遍

在输注 CIK 细胞后精神症状好，同时食欲增强、
睡眠改善、体力增强、体重增加．

卵巢癌 11 例，Ⅱ期 2 例，Ⅲ～Ⅳ期 9 例，失

访 5 例．治疗效果与疗程相关，治疗 2 个疗程以
上有 5 例，最长随访时间为 32 月，中期随访时间
为 11 月．近期疗效评价中，部分缓解 4 例，近
期有效率为 66.67%，疾病控制率为 66.67%．

子宫癌 11 例，Ⅱ期 2 例，Ⅲ～Ⅳ期 9 例，失

访 5 例．10 例行手术和化疗后实行 CIK 治疗，5
例治疗 2 个疗程以上．最长随访时间为 26 月，中
期随访时间为 13 月．近期疗效评价中，部分缓解
6 例，近期有效率为 100%，无肿瘤进展时间为

4～26 个月，中位无肿瘤进展时间为 13 个月．

2.5

免疫学疗效评价

治疗结束后 2 周，所有患者 CD3

、CD4

均

较治疗之前有明显升高（P＜0.05）；在 CIK 细胞
治疗之前，CD3

平均百分率为（54.66±8.19）％，治