4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g 离心 10 分钟,取上清液
5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70
℃保存,避免反复冷冻。尽可能的
不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在
37
℃或更高
的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释
比例按下表中进行:
80 g/L(6 号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入 50ul。
40 g/L(5 号标准品)100ul 的原倍标准品加入 100ul 的标准品稀释液
20 g/L(4 号标准品)100ul 的 5 号标准品加入 100ul 的标准品稀释液
10 g/L(3 号标准品)100ul 的 4 号标准品加入 100ul 的标准品稀释液
5.0 g/L(2 号标准品)100ul 的 3 号标准品加入 100ul 的标准品稀释液
2.5 g/L(1 号标准品)100ul 的 2 号标准品加入 100ul 的标准品稀释液
0 g/L(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入 50ul。
2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水 50 倍稀释。
操作步骤
1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气
泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复
孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液
1:1 稀释
后加入
50ul 于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品 50ul 于反应孔、加入待测样品 50ul 于反应孔内。立即加入 50ul 的
生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,
37
℃温育 1 小时。