菌种保藏中的细菌鉴定方法
作为科研生产中最重要的基础性资源—菌毒种,其收集、保藏及相关的研究工作在我国正
处于整理、整合以及全方面逐步正规化阶段
.2003 年 7 月 23 日,科技部在北京召开了“国家科
技基础条件平台建设
”部际联席会和专家顾问组成立大会,正式启动了国家科技基础条件平
台建设工作
.国家自然科技资源共享平台建设作为其中的一个重要组成部分同步启动.作为该
项
8 的一个重要组成部分,微生物菌种资源整理、整合工作同期启动,在此项工作中,中国兽医
药品监察所承担了兽医微生物资源整理、整合工作
.本所在行业内发展了数家加盟单位,在整
理、整合菌种资源的过程中遇到了一些实验室细菌鉴定结果出现偏差的问题
.经分析调查,多
是由于实验室人员结构以及实验室的硬件水平差别较大等原因
,造成实验室间鉴定能力的参
差不齐
,致使鉴定项目完成情况不尽相同,细菌鉴定结果出现偏差.
细菌鉴定是指将分离培养获得的病原菌,通过纯化培养使其达到不含有其他微生物的纯培
养程度
,继而进行系统鉴定.而菌种保藏机构在收集一些已经冻干的菌种时,应在开启后经过
两代的适应性培养方可进行复核性的系统鉴定
.系统鉴定是通过细菌的形态结构、生长特性、
抗原性、病原性以及目前流行的核酸测定方法等检测
,并用已知标准免疫血清确定分离细菌
的属、种和型
(群).目前菌种保藏机构通常使用的细菌鉴定方法大致有以下几种:
1、传统方法
常规宏观菌落形态学观察,主要观察菌落在其适合的培养基上的生长状况:细菌在固体培养
基上的生长形态、大小、颜色是否均匀一致
,菌落个体表面及边缘的生长状况;在液体培养基上
的浑浊状况、沉淀状况、液面菌膜状况
;半固体上穿刺接种后,观察细菌是否沿着接种线生长以
及其生长状态是呈毛刷样生长还是均匀生长
,上下生长是否一致.在鉴别培养基上培养,观察
结果是否跟预期结果相同
.