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为 10 h:14 h,以丰年虾为食,每天投食 2~3 次.实验时挑选鱼龄为 6~8 个月,体长为(30
±2)mm 的斑马鱼,每组实验用鱼 5 条,雌雄比例为 3:2,实验前 24 h 不喂食.
2.2 实验设计
2.2.1 斑马鱼急性毒性实验
参照国际标准 ISO 7346 1-3《物质对淡水鱼(斑马鱼)急性致死毒性的测定》,以 1.5
g(鱼)· L-1 的要求,设置 6 个浓度梯度,每个浓度设 3 个平行,每组放 10 尾斑马鱼.实验
开始后第 0、8、12、24 h 观察并记录各容器实验鱼的存活情况.用镊子夹鱼的尾部,如无反
应,即认为鱼已经死亡,发现死鱼后及时捞出.利用 Graphpad Prism 5.0 拟合剂量-效应曲
线并计算得出 24 h 半致死浓度(LC50-24h).
2.2.2 斑马鱼鱼群行为变化实验
采用水质毒性在线检测仪(RTB,深圳水务(集团)有限公司研制)进行斑马鱼的个体和群
体行为变化的定量监测,如图 1 所示.在一个尺寸为 400 mm×75 mm×300 mm 的测试箱前设
置一个 CCD 摄像头,利用摄像追踪系统和图像分析技术,通过识别每条鱼的特征轮廓来确定
斑马鱼的运动方向与位置,并以 12~16 帧每秒的速度记录标志点坐标通过软件转换计算出鱼
群的运动行为参数,包括游动行为(速度和高度)、通讯行为(平均距离和分散度)和区域分布
情况(各区域停留时间占总时间的比例),各指标定义如表 1 所示.
图 1 测量斑马鱼行为变化的实验装置设计图
表 1 监测指标的解析