3.1 培养箱、水浴箱、干热灭菌箱和高压灭菌锅:
① 首次安装时要对温度的稳定性和一致性进行校准。②记录培养箱、水浴锅和干热灭菌
箱的温度稳定性达到平衡所需的时间。
③每次经检定合格后方能使用,并对这些设备的运行
温度进行记录。
④定期清洁和消毒内外壁。⑤高压灭菌锅的时间和温度指示的准确度应满足
要求,不能仅依靠高压锅的压力表测定时间,应使用感应器控制和监控运转循环情况。
3.2 药品配置:
① 培养基通常采用高压湿热灭菌法,121℃灭菌 15min,特殊培养基按使用者的特殊要
求进行灭菌
(如含糖培养基 ll5
℃灭菌 20min。②部分培养基(如嗜盐琼脂培养基、胆硫乳培养
基等
),只能煮沸灭菌。
③对热敏感的培养基或添加物应采用膜过滤方法进行过滤除菌。
3.3 器具
① 湿热灭菌:采用高压灭菌器 121℃灭菌 20min,适用于玻璃器皿、移液器吸头、塑料
瓶等。按照
GB15981 的规定评价高压灭菌器的杀菌效果。在高压灭菌时注意灭菌物品不要相
互挤压过紧,以保证蒸汽通畅,使所有物品的温度均上升,才能达到彻底灭菌的目的。
②干
热灭菌:采用干燥箱灭菌
160
℃灭菌 2h,180℃灭菌 1h 适用于玻璃器皿、不锈钢器具等。
4 样品的采集、运输和保存
样品的采集必须具有代表性,要考虑到各种影响样品质量的因素,防止样品受到外源
性污染,防止样品变质和细菌生长。采样必须在无菌操作下进行,所谓无菌操作是指杜绝任
何病原性或非病原性微生物进入样品。采样用具及包装物必须是灭菌的。冷冻食品保持冷冻
状态;非冷冻食品需保持在
(0~5)
℃中保存。样品的运输和保存应避免日光照射,必须防止
外来物的污染。样品从采样点送达实验室应越快越好,一般不超过
3h,实验室检测工作应
尽快进行,长时间冷冻可导致微生物死亡,反复冷冻和融化对微生物也有很大影响必须尽
快进行检测。
5 操作
(1)操作人员必须牢固树立无菌观念,整个操作均要求无菌操作,尽量靠近火焰,动作
要迅速,从微生物的分离、纯化到接种,手法规范。严格按照
GB/T4789 食品微生物检验标
准中的操作规程进行检验。
(2)进入无菌室从样品的制备到检验都要为防止二次污染采取必要措施,如样品及器皿
摆放整齐便于操作,操作过程熟练。
(3)样品取样时用无菌工具无菌操作取样。
(4)原始记录要真实准确,不得随意填写。按照 GB/T4789 标准规定的方法进行数据处理
及结果判定。
综上所述,只要我们遵守职业道德,严谨科学态度,注意以上几个环节就能使我们微
生物检验数据的准确性得以保证,以把好食品卫生和安全提供可靠依据。
参
考 文 献
[1] 李勇.实验室生物安全[M].第 1 版.北京:军事医学科学出版社,2009,09.
[2] 齐小秋.病原微生物检验.卫生部病原微生物检验教材编写组,2009,02.
[3] 李志勇,谢均宪,许龙岩.食品微生物检验的质量控制[J].检验检疫科学,2004,14(4).